適于黃瓜葉片蛋白質組分析的雙向電泳方法最佳條件的研究

摘要: 為建立適于黃瓜葉片蛋白質組分析的雙向電泳方法, 對黃瓜葉片蛋白提取方法、裂解緩沖液、等電聚焦( IEF) 參數進行研究。結果表明: 丙酮法或三氯乙酸/丙酮法提取黃瓜蛋白質較好, 2- DE 圖譜中蛋白點較多; 裂解緩沖液為9.5mol·L- 1 尿素, 2mol·L- 1 硫脲, 1%二硫蘇糖醇(DTT), 2mmol·L- 1 三丁基磷( TBP) , 4% 3- [3- (膽酰氨丙基)二甲銨基]丙磺酸內鹽(CHAPS), 0.2%兩性電解質,0.002%溴酚藍, 0.25% 吐溫20, 10%異丙醇, 5%甘油, 10mmol·L- 1 苯甲基磺酰氟(PMSF)時, 電泳圖譜效果最好; IEF 等電聚焦條件為25000Vh 時, 2- DE 圖譜蛋白點多且清晰。