失血性休克大鼠肝臟蛋白質的差異分析

摘要　應用蛋白質雙向凝膠電泳(two2dimensional polyacrylamide gelelectrophoresis , 22DE) 技術,分析在急性重度失血性休克(refractoryhemorrhagic shock , RHS) 條件下,大鼠肝臟蛋白質組表達的差異.16 只雄性Wistar 大鼠隨機分成正常對照組( sham hemorrhage shock , SHS) 和RHS 模型組,每組8只. 采用股動脈放血的方法制備模型,在規定時間內處死大鼠并分離肝臟,提取肝臟總蛋白質后進行22DE. 運用Image Master 2D Platinum v 510 凝膠圖像分析軟件對22DE 凝膠圖像進行差異表達分析. 有意義的差異蛋白質點用基質輔助激光解析電離飛行時間質譜進行肽質量指紋圖譜分析,借助Swiss2prot 數據庫進行蛋白質搜索和鑒定. SHS 組和RHS 組肝臟的22DE 圖譜,分別平均識別到698±11 和700 ±13 個蛋白質點,SHS 組和RHS 組肝臟間平均匹配率達88 %～92 %. 共發現10 個差異有意義的蛋白質點,鑒定出了腫瘤抑制性抗原gp96、葡萄糖調節蛋白58 、過氧還蛋白Ⅰ、細胞色素b5 、谷胱甘肽轉移酶、ATP 合酶β亞單位、二磷酸果糖酶B、三磷酸甘油醛脫氫酶等8 種蛋白質.結果表明,以22DE 技術得到重復性和分辨率都較好的22DE 圖譜,并初步鑒定急性重度失血性休克后大鼠肝臟的差異表達蛋白質,為深入研究失血性休克的生理病理機制及尋找失血性休克預防和治療的生物標志物提供了依據.