人血清蛋白質組學方法的比較和優化

摘要 目的 對人未做處理的血清以及去除白蛋白和免疫球蛋白血清的蛋白質組學方法進行比較和優化。方法 應用雙向電泳一方法分離了未做處理的以及去除白蛋白和免疫球蛋白四的血清, 比較優化了高溫變性、水化液成份組成及泡脹方式等影響血清一分離效果的因素, 并用質譜分析鑒定未做處理和已處理血清的一譜圖中部分差異蛋白點。結果得到了分辮率和重復性較好的一譜圖, 未做處理的血清、去除白蛋白及血清的平均蛋白質』點分別為士個和土個, 質譜分析了個差異蛋白點, 鑒定為種蛋白質, 其中種為功能白質。僅出現在未做處理血清中的蛋白有種, 分別是維生素結合蛋白、可溶性尿激酶血纖維蛋白溶酶原激活劑受體、蛋白激酶抗原、血清白蛋白。種蛋白僅出現在去除白蛋白和的血清中, 分別是脫氫酶輔酶亞基、肌動蛋白結合蛋白、細胞活性受體鏈、血小板生長因子。結論 去除高豐度蛋白可增加一些低豐度蛋白質的檢出, 但非特異性吸附會導致部分功能蛋白質的丟失。