人外周靜脈血血清蛋白質雙向凝膠電泳條件優化

摘要: 目的　優化人外周靜脈血血清蛋白質的雙向凝膠電泳條件。方法　血清總蛋白經去除白蛋白、IgG和丙酮沉淀去鹽分處理后,固相pH梯度等電聚焦( IEF)和十二烷基硫酸鈉2聚丙烯酰胺凝膠( SDS2PAGE)進行蛋白質電泳,對蛋白質的上樣量、固相pH梯度( IPG)膠條的pH值范圍、凝膠濃度、水化上樣液體積和IEF程序及其參數等條件進行優化。結果　將50～100μg蛋白質溶解于終體積為350μl水化上樣液,應用pH 4～7的IPG膠條和濃度12%的SDS2PAGE凝膠進行雙向電泳,經優化電泳電流、時間等參數后,建立了合適的雙向凝膠電泳條件,得到比較理想的蛋白質二維圖譜。結論　優化了血清蛋白質雙向凝膠電泳條件,為進一步開展血清差異蛋白質組學研究奠定基礎。