人晶狀體上皮細胞蛋白質組的雙向電泳和質譜鑒定

[摘　要] 　目的: 建立人晶狀體上皮細胞蛋白質組研究體系,探討雙向電泳和質譜鑒定技術在人晶狀體上皮細胞蛋白質組研究中的作用。方法: 體外培養人晶狀體上皮細胞株,用兩種不同方法提取總蛋白,進行固相pH梯度( IPG)等電聚焦雙向凝膠電泳,凝膠通過GS - 800掃描儀(Bio - Rad)獲取圖像并使用PDQuest專業圖像分析軟件分析。在此基礎之上,胰酶消化蛋白質斑點并進行質譜分析。結果: 獲得了重復性較好的人晶狀體上皮細胞蛋白質組電泳圖譜。晶狀體蛋白質斑點在等電點pH值為4 - 7、相對分子質量為17 - 72 kD之間均有分布。其中高豐度蛋白點主要分布于分子量19 - 50 kD、P I 5 - 7范圍內。2個蛋白點通過質譜分析和數據庫的檢索得到了初步的鑒定。結論: 建立起了一個穩定的分析人晶狀體上皮細胞蛋白質組學實驗體系;為進一步研究人類晶狀體在生理狀態及白內障等病理條件下的改變提供了蛋白質組學的研究方法和途徑。