人表皮細胞與角膜上皮細胞蛋白質組的差異表達初步研究

摘要 目的: 應用蛋白質組技術比較人表皮細胞與角膜上皮細胞之間的蛋白質表達差異。方法: 實驗于2005- 11/2006- 10 在中山大學中山眼科中心國家眼科學重點實驗室完成。分別培養人表皮細胞與角膜上皮細胞,裂解原代細胞抽提總蛋白, 精確定量后進行雙向電泳, 掃描電泳凝膠獲得二維總蛋白圖譜。圖譜使用軟件輔助比較分析, 找出差異表達點, 從凝膠中摳取差異點, 膠內酶解后用基質輔助激光解吸附/ 電離飛行時間串級質譜法鑒定差異蛋白。結果: 人表皮細胞與角膜上皮細胞蛋白質凝膠分析獲得600 余個清晰的蛋白質斑點, 在比較分析出的26 個差異點中初步鑒定出4 個差異表達蛋白, 分別是細胞內氯離子通道1、Psorias in、乳酸脫氫酶B 和絲氨酸蛋白酶抑制因子。結論: 人表皮細胞與角膜上皮細胞在蛋白質表達上有較高的相似性以及較好的可比性, 為探索表皮細胞橫向分化成角膜上皮細胞的分子機制做出了有益的嘗試, 并提供了具有一定可操作性的實驗方法。