人C2型利鈉肽2血清白蛋白融合蛋白質的構建及在畢赤酵母中的分泌表達

摘　要:目的構建重組表達人C2型利尿鈉肽(CNP)2人血清白蛋白(HSA) 融合蛋白質的畢赤酵母。方法重疊PCR 拼接CNP(400 bp)2HSA(1 800 bp) 成融合基因,雙酶切后克隆至表達載體pPIC9K中。電穿孔法轉染畢赤酵母菌KM71 ,搖瓶培養分泌表達。結果融合基因約為2 200 bp ,序列測定正確。SDS2PAGE 分析相對分子質量約為80 000 ,Western blot 和RIA 鑒定顯示其為CNP 與HSA 的雜合分子。結論實現HSA2CNP 融合蛋白質在畢赤酵母中的分泌表達。