雙水相萃取與疏水層析分離基因工程人溶菌酶

摘要:采用雙水相萃取與疏水層析分離純化重組巴氏畢赤酵母表達的基因工程人溶菌酶。通過正交實驗方法研究了聚合物濃度、鹽濃度和p H 對雙水相體系萃取人溶菌酶過程的影響。結果表明:當雙水相萃取的p H 為4 ,硫酸鈉、氯化鈉、PEG4000 的質量濃度為0. 13 、0. 06 和0. 08 時,人溶菌酶上相回收率達98. 8 %,純化因子18. 0 ,濃縮因子3. 6 。雙水相萃取后選用高效疏水層析色譜純化人溶菌酶,經苯基高取代基介質疏水層析后得到純化因子為22. 7 ,收率為88. 4 %的人溶菌酶純化產品,電泳純度檢測為100 %。