雌激素影響卵巢癌細胞系COC1 /DDP 順鉑耐藥的蛋白質雙向凝膠電泳圖譜分析

【摘要】目的順鉑對細胞DNA 鏈作用具有選擇性, 它對增生活躍的細胞, 特別是S 期細胞殺傷力強。將雌激素先作用卵巢癌細胞一定時間后再加入順鉑, 判斷它能否作為促使癌細胞進入順鉑敏感期誘導劑并初步探討雌激素協同順鉑的作用機制。方法選擇人卵巢腺癌上皮細胞系COC1 和順鉑耐藥系COC1 /DDP 為研究對象。MTT 法先測定預先加入雌激素16 h 對10 μmol /L 順鉑作用下的卵巢癌細胞生長影響。然后利用雙向凝膠電泳分離預先加入50 μmol /L 雌激素16 h 與10 μmol /L 順鉑共同培養COC1 /DDP 和COC1 細胞48 h 的總蛋白,銀染顯色, Imagemaster 圖像分析系統分析, 從膠中選取部份分離較好的差異蛋白質點, 基質輔助激光解析電離飛行時間質譜分析獲取肽質量指紋圖譜, Peptident 軟件搜索數據庫鑒定蛋白質。結果雌激素促進順鉑對卵巢癌細胞系COC1 和COC1 /DDP 生長有抑制作用。獲取了重復性和分辨率較好的50 μmol /L 雌激素與10 μmol /L順鉑共同培養的COC1 和COC1 /DDP 細胞雙向凝膠電泳圖譜。質譜分析了5 個蛋白質點, 獲取了5 張肽質量指紋圖譜。4 個可能參與雌激素促進順鉑效應蛋白質: COC1 中有鋅指蛋白多型2 和FK506 結合蛋白5; COC1 /DDP中為微管β鏈蛋白和胞核包含頡酪肽蛋白相似蛋白。結論雌激素增加了卵巢癌細胞系COC1 /DDP 順鉑敏感性。雌激素協同順鉑抑制COC1 和COC1 /DDP 細胞生長中出現差異蛋白質對理解雌激素提高卵巢癌順鉑敏感性機制提供了有價值的信息。