痹腫消湯干預膠原誘導性關節炎大鼠滑膜病變的蛋白質組學研究

摘要 目的, 觀察痹腫消湯干預膠原誘導性關節炎大鼠滑膜病變的蛋白質改變#分析痹腫消湯治療類風濕關節炎可能的作用機制。方法：實驗于(%%$0%1 4 (%%10%( 在中南大學湘雅醫院中西醫結合研究所實驗室、衛生部腫瘤蛋白質組學重點實驗室完成。)% 只5U 大鼠隨機分為- 組，正常組"% 只，其余+% 只大鼠采用牛!型膠原與完全福氏佐劑誘導5U 大鼠實驗性關節炎模型，選取造模成功者再隨機分為兩組，即痹腫消湯組和模型組。痹腫消湯煎液制備：白花蛇舌草"1 N，腫節風-% N，丹參"1 N，絡石藤(% N，骨碎補"1 N，苡米-% N 等"1 味中藥，雙蒸水煎( 次，-% B<9 4 次，兩煎混合，b$ 濾器過濾，于+% c水浴中濃縮成每毫升藥液含生藥""+ N。痹腫消湯組灌服痹腫消湯煎液"% B^ 4 ‘N（相當于生藥+(W" N），( 次4 D 灌服；模型組灌服生理鹽水"% B^ 4 ‘N，( 次4 D 灌服。正常組自由進水。應用雙向凝膠電泳技術分別分離正常組、模型組及痹腫消湯組大鼠關節滑膜的總蛋白后，經膠體考染顯色、圖像分析、識別差異表達的蛋白質點，應用J/^U80EfV0J5 質譜儀得到相應的肽質量指紋圖譜，然后搜索數據庫鑒定部分差異蛋白質點。結果：納入實驗的)% 只大鼠，造模不成功被淘汰) 只，最終痹腫消湯組(+ 只、模型組() 只、對照組"% 只共+- 只大鼠進入結果分析。"建立了正常組、模型組和痹腫消湯組關節滑膜的雙向凝膠電泳圖譜，其平均蛋白質點數分別為*$)g-*，**$g$"，"%-"g1(，其匹配率為*(h，*"h，*$W(h。#發現并鑒定了正常組、模型組和痹腫消湯組大鼠滑膜的差異表達大于( 倍的蛋白質點11 個，這些差異表達蛋白質的功能涉及物質代謝、能量產生、物質轉運、抗氧化應激、信號轉導及細胞骨架蛋白，隨即用免疫印跡的方法差異蛋白質G99>\<9 "、GHD?HG:> / 在正常組、模型組、痹腫消湯組中的表達，其結果也顯示了類似的表達差異。結論：類風濕關節炎模型關節滑膜病變是一個多種蛋白質參與的復雜過程。滑膜組織的比較蛋白質組學分析是一種篩選病變相關蛋白的可方法之一。G99>\<9 "、GHD?HG:> / 可能與實驗性關節炎的關節滑膜病變有關；痹腫消湯可能通過對實驗性關節炎大鼠滑膜蛋白質表達的調控達到治療目的。