急性淋巴細胞白血病白細胞磷酸化蛋白質分析方法的建立

摘要 目的：建立一種對急性淋巴細胞白血病白細胞磷酸化蛋白質分析方法。方法：分離人新鮮外周血白細胞，并隨機分為刺激組和對照組。裂解細胞，用Bradford 法測定細胞蛋白質含量，利用親和層析富集白細胞磷酸化蛋白質，SDS- PAGE 分離磷酸化蛋白質，采用Scion Image 軟件分析電泳結果。結果：①電泳圖譜顯示每條泳道中蛋白質條帶清晰，其相對分子量主要介于26～36kDa 以及47～65kDa 之間。②EGF 刺激后出現有磷酸化蛋白質條帶的增減或某些磷酸化蛋白質條帶灰度的增強或減弱。結論：采用本研究建立的分析磷酸化蛋白質的方法對急性淋巴細胞白血病白細胞ERK 相關磷酸化蛋白質進行動態的分析，其方法較簡便、結果可信，可為細胞信息傳遞磷酸化蛋白質組的研究奠定了基礎。