降纖酶的分離純化及其性質

摘　要: 蛇毒蛋白對抑制血栓形成和溶解血栓具有較好的療效, 但由于得不到性質穩定、組分單一的酶蛋白, 影響了其臨床效果。該研究通過親和層析方法, 從長白山白眉蝮蛇烏蘇里種蛇毒中分離提純到SDS2PA GE 圖譜為單一組分糖蛋白——降纖酶, 相對分子質量約3. 6×104。該酶具有體外凝血、體內抗凝作用。等電點約為4. 25。HPLC 分析結果表明其純度為99%。最適溫度為70 ℃, 最適pH= 8. 0。動力學研究表明該酶為一M ichaelis2M enten 酶, M ichaelis 常數為0. 320mmo l?L , 最大反應速度為0. 117 Lmo l?m in。EDTA ,M g2+ , Cu2+ 對其有抑制作用。測定該酶N 端20 個氨基酸的序列是V al IleGluGluA spGluCysA sn IleA snGluH isA rgPheL eu ,與其他的蛇毒類凝血酶有高度同源性。