麥胚凝集素的分離純化及其在親和層析中的應用

[摘要] 目的:將分離純化麥胚凝集素(WGA) 的方法和固定化WGA 親和層析柱的制備方法進行改良,從而得到能夠有效結合細胞膜受體的親和層析柱。方法:依次用去脂抽提、分級鹽析、離子交換層析、甲殼素親和層析的方法分離純化WGA;將制備的WGA 與用溴化氰活化的瓊脂糖4B(Sepharose 4B) 耦聯固定。結果:得到的純化倍數為15815 倍的WGA 單體相對分子質量為16 000 ,表觀相對分子質量為32 000 ,血凝活力為813 mg·L - 1 。WGAOSepharose4B 可以與紅細胞表面糖基特異性結合。結論:改良的WGA 分離純化方法和固定化WGA親和層析柱的制備方法簡便、有效,可用于實驗室中細胞膜受體的研究。