放療敏感性不同宮頸癌組織的蛋白質組學比較研究

[摘要] 　目的:比較放療敏感性不同的早期宮頸癌組織之間蛋白質組的差異,為確定宮頸癌放療敏感性相關標志物提供依據。方法:收集進行治療前的早期宮頸癌組織標本。根據放療后WHO實體瘤療效判斷標準,選擇其中對放療敏感和不敏感的標本分為高敏感組和低敏感組。提取組織總蛋白,進行雙向凝膠電泳得到凝膠圖譜,采用PD2quest 7. 0軟件進行匹配和差異分析,識別兩組之間表達差異蛋白點。將部分差異蛋白點進行膠內原位切割、酶解后進行MALD I2TOF2MS分析,獲取肽質量指紋圖,數據庫搜索鑒定蛋白質。應用Western印跡技術驗證篩選的部分差異表達蛋白的表達。結果:建立了分辨率高、重復性好的宮頸癌放療高敏感組和低敏感組的雙向凝膠電泳圖譜。高敏感組蛋白點(754 ±64)個( n = 5) ,低敏感組蛋白點(777 ±48)個( n = 5) ,組間平均匹配率為87. 6%。選擇部分差異在2倍以上的蛋白斑點進行質譜分析, 8個差異表達蛋白被成功鑒定,其中5個蛋白質在高敏感組高表達, 3個蛋白質在高敏感組低表達。Western印跡結果與蛋白質組篩選結果基本一致。結論:放療高敏感組和低敏感組宮頸癌組織間存在蛋白表達的差異,這些差異表達的蛋白可能與放療敏感性有關。