蛋白質組學技術篩選與鑒定鯉魚嗅腦急性創傷后的應激蛋白質

摘　要　優化建立鯉魚( cyp rinus carp io, CC)嗅覺端腦(嗅腦)全蛋白提取技術。聯用低滲透裂解和液氮凍溶法破碎鯉魚嗅腦組織( rhinencephalon tissue of cyp rinus carp io, CCRT) 、低速離心提取CCRT全蛋白,并采用雙向凝膠電泳(2D2PAGE)技術進行有效分離。經分析與統計,每張CCRT的2D2PAGE圖譜中的蛋白質斑點數目約為1200個。分別分離CCRT的脂溶性和水溶性全蛋白,并獲得高分辨率的2D2PAGE圖譜。選用差異蛋白質組學技術篩選經10%冰醋酸創傷后的CC,其端腦組織所表達出的6種應激蛋白質,并用肽質量指紋譜(pep tide mass fingerp rinting, PMF)和數據庫檢索技術給予鑒定。其中3種蛋白質為70S熱休克蛋白、β微管蛋白和DNA鏈接酶IV,有望作為研究大腦急性創傷后的應激修復途徑和機理的指示蛋白質。