蛋白質組學技術篩選大鼠肝臟大部切除后肝再生相關差異表達蛋白

[摘要] 　目的:應用蛋白質組學技術觀察大鼠肝臟大部分切除術后蛋白表達情況,篩選肝臟切除后肝再生相關的差異表達蛋白。方法:大鼠隨機分為肝大部切除組( n = 35) 和假手術對照組( n = 5) 。肝大部切除組大鼠無菌條件下切除肝左外葉、左中葉和中葉共約70 %肝臟;假手術組大鼠僅開腹,不行肝大部切除。肝大部切除術后不同時間點(2 、12 、24 、36 、48 、72 、168 h) 各處死5 只大鼠,取右葉肝組織,提取大鼠肝臟總蛋白,以假手術組為對照,進行二維電泳和質譜分析,篩選差異表達蛋白,并對其中差異顯著蛋白進行Western 印跡鑒定。結果:電泳圖譜顯示肝臟70 %切除術后2 h 差異表達蛋白點開始增多,36 h 達到高峰;共篩選出78 個差異表達蛋白點,質譜技術鑒定出其中35 個有意義的蛋白點。35 個差異蛋白根據動態變化趨勢可分為5 類:3 類豐度上調蛋白和2 類豐度下調蛋白(各自間上調或下調時間和幅度均有所差異) ;這些蛋白主要涉及以下代謝途徑:
氧化應激反應、急性期反應蛋白、脂類代謝蛋白、能量代謝的酶類、信號轉導、神經遞質降解等,部分蛋白功能未知。Western 印跡鑒定證實其中的prohibitin 蛋白在肝大部切除術后2 h 開始上調,36 h 達高峰,48 h 后趨于正常水平。結論:多種信號和代謝途徑參與肝臟大部切除后的肝臟再生過程。