重組SARS2CoV S1蛋白抗原表位分析及抗原性檢測

摘要:目的對嚴重急性呼吸系統綜合征冠狀病毒( SARS2CoV)刺突蛋白( Sp ike, S) S1段進行原核重組表達,并檢測表達產物的抗原性。方法對S1中的HLA抗原表位進行預測分析,根據分析結果選定用于重組表達的區段,利用pET21b載體進行原核表達,將產物純化后利用SARS抗血清進行抗原性檢測。結果抗原表位分析表明, S1中包含有多個能夠被HLA分子有效提呈的抗原表位,綜合考慮表位肽的分布、重組表達的效率、重組蛋白的空間構象以及引物設計的優化等因素,選取S1中的關鍵區域259～565 aa進行原核重組表達,得到了包涵體形式的重組蛋白,經過純化和復性,獲得了純度較高的可溶性S1蛋白;用SARS抗血清對此重組蛋白進行免疫學鑒定,表明該蛋白具有SARS特異的抗原性。結論重組表達的S1蛋白具有較強的抗原性,為進一步的疫苗研究和抗體篩選奠定了基礎。