當外源基因插入時,二者溶為一體后,有β-半乳糖苷酶表達,在生色底物5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷(x-gal)培養基中形成蘭色菌落。而當有外源基因插入到多克隆原點,從而造成插入失活,而使 lacZ基因不表達而形成白色菌斑。 通過顏色不同而區分重組子和非重組子。位于不同載體或染色體上的...
根據gus基因檢測所用的底物不同,可以選擇三種檢測方法:組織化學法、分光光度法和熒光法(靈感度為分光光度檢測法最高)。其中最為常用的是組織化學法。組織化學法檢測以5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸(X-Gluc)作為反應底物,將被檢材料用含有底物的緩沖液浸泡。若組織細胞發生了gus基因的轉化,并表達出Gus,在適宜的條件下,該酶就可將X-Gluc水解生成藍色產物。...
在IPTG(異丙基硫代β-D-半乳糖苷)的誘導下,β半乳糖苷酶能將X-Gal(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷)切割成半乳糖和藍色的底物5-溴-4-靛藍。因此,任何攜帶lacZ基因的質粒載體轉化到β半乳糖苷酶突變的大腸桿菌細胞后,都會在涂有IPTG和X-Gal的培養基平板上形成藍色菌落。...
β-半乳糖苷酶基因在基因工程中的應用:β-半乳糖苷酶基因被廣泛地應用于包括作為報告基因、構建載體、轉基因研究和基因治療等多個分子生物學研究領域。具體介紹如下:1在載體構建中的應用β-半乳糖苷酶可催化X-ga1(5-溴-4-氯-3-吲哚-β-D-半乳糖苷) 水解,產物呈藍色,易于檢測和觀察,基于這一特點,β-半乳糖苷酶基因常作為載體組分,廣泛地應用于各類研究中。...
Copyright ?2007-2022 ANTPEDIA, All Rights Reserved
京ICP備07018254號 京公網安備1101085018 電信與信息服務業務經營許可證:京ICP證110310號