實驗方法原理高效液相色譜法是一種重要的色譜分離技術。根據所用固定相和分離機理的不同,一般將高效液相色譜分為分配色譜、吸附色譜、離子交換色譜和空間排斥色譜等。在分配色譜中,組分在色譜柱上的保留程度取決于它們在固定相和流動相之間的分配系數K:為組分在固定相中的濃度與組分在流動相中濃度之比。顯然,K值越大,組分在固定相上的保留時間越長,固定相與流動相之間的極性差值也越大。...
LogP* — 其中P為化合物在正辛醇和水中的分配系數,表中值為ChemAxon軟件計算獲得。結果和討論對于藥物卡鉑,其中的3個組分卡鉑、順鉑和二碘二胺鉑都是極性很強的化合物,如表1所示,其logP值在0-1之間;因此,采用反相LC分析時,化合物保留很弱,需要用到極高比例水相洗脫,對柱壽命以及方法的耐受性上會帶來一定問題。...
然而,由于長時間正相硅膠的強大的極性作用,經常會和樣品形成死吸附,影響分離效果,科學家在硅膠是基礎上進行了修飾,將C碳鏈連接到硅膠的羥基上使其極性降低,具有了脂溶性的特質,同時由于固定相基質的變化,之前在正相當中所使用的的溶劑變得不可用,需要使用水相和有機相混合體系進行洗脫,由于各類化合物在水相和有機相之間都有相應的分配系數,樣品的分配系數不同,洗脫下來的速度就會形成差異,最終達到分離的目的。...
四、色譜分離原理高效液相色譜法按分離機制的不同分為液固吸附色譜法、液液分配色譜法(正相與反相)、離子交換色譜法、離子對色譜法及分子排阻色譜法。1.液固色譜法 使用固體吸附劑,被分離組分在色譜柱上分離原理是根據固定相對組分吸附力大小不同而分離。分離過程是一個吸附-解吸附的平衡過程。常用的吸附劑為硅膠或氧化鋁,粒度5~10μm。...
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