測定水中微生物(包括細菌真菌等)數量的方法
器材及培養
?材料和試劑
蒸餾水,?自來水,?取自兒童公園的湖水,?牛肉膏蛋白胨瓊脂培養基.
儀器或其他用具
滅菌三角燒瓶,?滅菌帶玻璃塞瓶,?滅菌培養皿,?滅菌吸管,?滅菌量筒.
?研究方法
采用平板菌落記數技術測定水中細菌總數.
?水樣的采取
?自來水
先將自來水水龍頭用火焰灼燒3?min?滅菌,?再開放水龍頭5?min?后,?以滅菌三角燒瓶接取水樣,?以待分析.
?公園的湖水
應取距水面10~?15?cm?的深層水樣,?先將滅菌的帶玻璃塞瓶,?瓶口向下浸入水中,?然后翻過來,?除去玻璃
塞,?水即流入瓶中,?盛滿后,?將瓶塞蓋好,?再從水中取出,?最好立即檢查,?否則需放入冰箱中保存.
?細菌總數的測定
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?自來水
Step?1?用滅菌吸管吸取1?mL?水樣,?注入滅菌培養皿中.?共做兩個平皿.
Step?2?分別傾注約15?mL?已溶化并冷卻到45?e?左右的肉膏蛋白胨瓊脂培養基.?并立即在桌上做平面
旋搖,?使水樣與培養基充分混勻.
Step?3?另取一個空的滅菌培養皿,?傾注肉膏蛋白胨瓊脂培養基15?mL,?作對照.
Step?4?培養基凝固后,?倒置與37?e?溫箱中,?培養24?h,?進行菌落記數.
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公園的湖水
Step?1?稀釋水樣,?取三個滅菌空試管,?分別加入9?mL?滅菌水.?取1?mL?水樣注入第一管9?mL?滅菌水
內,?搖勻,?再自第一管取1?mL?到下一管滅菌水內,?如此稀釋到第三管,?稀釋度分別為10-?1?,?10-?2?,?10-?3?.
Step?2?自最后三個稀釋度的試管中各取1?mL?稀釋水加入空的滅菌培養皿,?每一稀釋度共做兩個培養皿.
Step?3?各傾注15?mL?已溶化并冷卻到45?e?左右的肉膏蛋白胨瓊脂培養基并立即在桌上搖勻.
Step?4?凝固后倒置于37?e?恒溫恒濕培養箱中培養24?h.
?菌落記數方法
1)?計算相同稀釋度的平均菌落數.?若有大片菌苔生長時,?棄用;?以無片菌苔生長的培養皿記數.?若片狀菌
苔大小不到培養皿的一半,?其余一半分布均勻,?將此一半計數@?2.
2)?選擇平均菌落數在30~?300?之間的平板.?只有一個符合此范圍時,?以該平均菌落數@?稀釋倍數.?有兩
個在30~?300?之間時,?按兩者菌落總數比值決定,?比值小于2,?取平均;?比值大于2,?取較小的菌落數.
3)?若所有稀釋度的平均菌落數均大于300,?則應按稀釋度最高的平均菌落數@?稀釋倍數.
4)?若所有稀釋度的平均菌落數均小于30,?則按稀釋度的平均數@?倍數.
5)?若所有稀釋度的平均菌落數均不在30~?300?之間,?則以最近30?或300?的平均菌落數@?稀釋倍數.
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微生物的含量能否反應水的營養化程度?
能?
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標準