AB SCIEX:為您提供差異化的質譜新技術
AB SCIEX 公司市場部李春波博士在2011年8月6日召開的中國質譜學會第31屆年會上為大家帶來了題為《AB SCIEX為您提供差異化的質譜新技術》的精彩報告。
AB SCIEX 公司市場部李春波博士 報告題目:AB SCIEX為您提供差異化的質譜新技術
生物樣品分析的基質效應、中草藥同分異構體樣品分析和共流出雜質分離分析等問題,對質譜提出了新的要求,有沒有可能在定性、定量的同時獲得高的分辨率是對目前質譜技術的一個考驗。AB SCIEX一直在致力于新技術的開發,在今年的ASMS上推出了離子淌度技術和SWATH?技術。接下來,李博士分別介紹了這兩種新技術。
離子淌度差分質譜技術
離子淌度(Ion mobility spectrometry,IMS),是一種以化合物的氣相離子在電場作用下發生遷移時的淌度來表征該化合物的方法。通常是根據離子在電場和氣流的共同作用下的遷移率不同而對樣品的不同組分進行分離檢測的。AB SCIEX在今年的ASMS上推出了具備離子淌度技術的SelexION? 技術,結合了SelexION? 技術的5500三重四極桿 和QTRAP??5500系統,具有一種新維度的選擇性和分析性能,可用于分離同分異構體,消除共流出污染物的影響,降低高的背景噪音,提高數據質量,提高信噪比。離子在DMS中的分離,是通過施加分離電壓,根據離子在高電場和低電場遷移的差異來分離離子。
市場上有些公司已經采用,比如有一種是把離子淌度裝置放在碰撞室中,這時很多質譜掃描的方式就不能用了,并且這類儀器只能用離子淌度,增加的作用只限于分 離某些同分異構體。而AB SCIEX的SelexION裝置,離子淌度放在了離子源之后,Q0之前,即產生的離子通過淌度分離后,還可以在后面的任意一級質譜進行原來的各種質譜采 集和掃描方式,具有更高的適用價值,它最后的淌度表示橫軸是CV(V)(可以區分開同分異構體)。另外,由于離子淌度裝置安裝在離子源后,任何用戶可以無 需工具、不停真空、2分鐘內拆裝,所以用戶可以方便地選擇:用還是不用離子淌度。在離子源后的這種離子淌度,除了分離同分異構體,還可以降低背景噪音,提高復雜基質中分析物的靈敏度。
還有一類市場上已經采用的,也是放在離子源后,但它是一種同心環,這種方法做MRM的速度不高,另外拆裝也不是很方便。而SelexION裝置是一個幾毫 米的平板,在兩塊平板(10×30mm,1mm間隔)上加RF電壓在平板間形成電場,它進行MRM的速度更快(比環形提高4倍),可以更好地進行多混合物 分析和兼容于UHPLC的速度。此外,SelexION裝置非常棒的特點是,它集成了添加化學修飾劑(如異丙醇、甲醇、乙腈等)的功能,可以把離子淌度的 分離能力提高10倍,因為化學修飾劑和樣品離子結合,具有動態的成簇(高電場時)/去簇(低電場時)模型,進一步加大了分子之間的差異(如尺寸上的差 異)。
另外,SelexIon裝置還有一個COV補償電壓,用于校正目標離子的運動軌跡,確保通過DMS到達質量分析器,而基質被有效地去除。SelexIon 裝置的調諧穩定性非常好,在超過24小時的固定分離電壓(SV)下,優化的補償電壓(COV)偏移量小于DMS峰寬(半峰高處的峰寬,通常為2.5V)的 10%,適用于定量分析和法規實驗室應用。通過血漿樣品1000次重復進樣(66 hours),結果顯示的重現性和耐用性滿足法規生物分析準則。
SelexIon裝置圖
DMS如何分離選擇離子
加入化學修飾劑對增大分子差異的作用
分離同分異構體
DMS系統的應用
DMS系統降低了化學背景噪音,廣泛應用于同分異構體的分離,共流出雜質的分析,及對復雜基質中的目標化合物的定量分析。下面,李博士通過具體的實例,形象地為大家展現了DMS系統在應用中的優異性能:
1.Pentoxifylline(血管擴張藥物)的LOQ提高20倍,消除了高化學噪音;
2.含有前列腺素F2α(PGF2α)的類花生酸標準品混合物分析的選擇性顯著提高;
3.尿液中鹽酸克倫特羅分析,顯著降低和消除了共流出雜質干擾;
4.對B性腦鈉肽的32個氨基酸分析,顯著降低和消除了共流出雜質干擾。
李博士對具備差分離子淌度分離能力的SelexION? 技術進行了總結,AB SCIEX Triple Quad? 5500和QTRAP? 5500系統的SelexION?技術,開創了選擇性和分析效率的新紀元。降低背景噪音,提高了數據質量和檢測限;對同分異構體,特別是手性化合物具有很 好的分離能力;應用化學修飾劑顯著提高了DMS系統的分離能力;卓越的系統穩定性和重現性滿足生物分析確證的需求;提高通量降低對色譜分離和樣品制備的要求。
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SelexION? 差分離子淌度裝置
SWATH?技術
SWATH技術在2011年6月ASMS上發布,是與蘇黎世聯邦理工學院 Prof. Ruide Aebersold及其團隊共同研發的,該技術為蛋白質組學研究帶來了一種全新的工作流程。數據采集方法是將掃描范圍劃分為以25 Dalton為間隔的一些列區間,通過超高速掃描來獲得掃描范圍內全部離子的所有碎片信息,是MS/MSALL 技術的擴展。
SWATH方法完成一次循環僅僅需要三秒左右的時間,針對目前對蛋白質組學分析的納升液相的一個色譜峰寬度來說,“這就像我們遙感衛星對地面形貌進行快速航拍分析一樣,能在很短的時間內獲得地貌形態的完整分析。”李博士形象比喻。
傳統的MRM方法通常只是獲得一些離散的數據點,用基于TripleTOF 5600的高分辨的MRM方式,可以對數據進行更準確的分析,但仍然不是樣品的完整信息;最新推出的SWATH技術流程,通過快速的掃描速度加上對Triple TOF MS/MSALL 設置,得到完整的信息。
SWATH技術只能在 TripleTOF? 5600 上完成,因為這需要將極高的采集速度與定量能力、精確質量及高分辨率整合在一起才能實現。在定性鑒定后進行全面的定量分析,不需要方法開發;獲得所有化合物的信息,可以對所有化合物進行溯源;高分辨的定量分析減少潛在的干擾;定量能力達到了三重四極桿質譜的水平。
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