熒光定量pcr中溶解曲線的溫度大概是多少
一般染料法定量pcr在進行完pcr后都要運行熔解曲線,一般設定先94度幾分鐘,然后驟冷到65度(假定65度為退伙溫度).在65度時,pcr產物是以雙鏈的形式存在的。
因為染料是插到雙鏈dna的小溝里然后發熒光的,所以這個時候檢測到很強的光信號,隨著溫度升高,雙鏈逐漸打開,熒光信號逐漸減弱。
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綜述