T4DNA連接酶的特性及種類
特性
大腸桿菌的DNA連接酶是一條分子量為75KD的多肽鏈。對胰蛋白酶敏感，可被其水解。水解后形成的小片段仍具有部份活性，可以催化酶與NAD(而不是ATP)反應形成酶-AMP中間物，但不能繼續將AMP轉移到DNA上促進磷酸二酯鍵的形成。
DNA連接酶在大腸桿菌細胞中約有300個分子，和DNA聚合酶Ⅰ的分子數相近，這也是比較合理的現象。因為DNA連接酶的主要功能就是在DNA聚合酶Ⅰ催化聚合，填滿雙鏈DNA上的單鏈間隙后封閉DNA雙鏈上的缺口。這在DNA復制、修復和重組中起著重要的作用，連接酶有缺陷的突變株不能進行DNA復制、修復和重組。噬菌體T4DNA連接酶分子也是一條多肽鏈，分子量為60KD，其活性很容易被0.2mol/L的KCl和精胺所抑制。
此酶的催化過程需要ATP輔助。T4DNA連接酶可連接DNA-DNA，DNA-RNA，RNA-RNA和雙鏈DNA粘性末端或平頭末端。另外，NH4C1可以提高在大腸桿菌DNA連接酶的的催化速率，而對T4DNA連接酶則無效。無論是T4DNA連接酶，還是大腸桿菌DNA連接酶都不能催化兩條游離的DNA鏈相連接。
種類
常用的DNA連接酶有兩種：來自大腸桿菌的DNA連接酶和來自噬菌體的T4DNA連接酶。二者的作用機理類似。T4連接酶作用分三步：
(1) T4DNA連接酶與輔助 因子ATP形成酶－AMP復合物。
(2) 酶－AMP復合物結合到具有5’－磷酸基和3’－羥基切口的DNA上，使DNA腺苷化。
(3) 產生一個新的 磷酸二酯鍵，把缺口封起來.
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