影響尿生成的因素
[目的和原理]
腎臟是機體重要的排泄器官,可通過生成尿液以完成排泄功能。尿生成的過程包括:腎小球的濾過、腎小管和集合管的重吸收及分泌與排泄。本實驗在急性實驗條件下通過施加不同的處理因素,觀察尿量及其成分的變化,分析各因素對尿生成的影響。 [實驗對象] 家兔。 [實驗器材和藥品] MS2000生物信號記錄分析系統、血壓換能器、保護電極、記滴器、恒溫水浴、哺乳類動物手術器械一套、兔手術臺、膀胱漏斗、注射器、酒精燈、試管架、50%葡葡糖溶液、生理鹽水、肝素生理鹽水、25%氨基甲酸乙酯溶液、1:10000去甲腎上腺素、速尿、班氏試劑。
[實驗步驟和觀察項目]
一、麻醉與固定:耳緣靜脈注射25%氨基甲酸乙酯(4ml/kg),待動物麻醉后仰臥位固定于兔臺上。
二、手術:
(一)頸部手術
l.沿頸部正中切開皮膚,分離左側頸總動脈,按常規將充滿肝素生理鹽水的動脈插管插入其內,通過血壓換能器連至記錄裝置,描記血壓。
2.分離右側迷走神經,穿線備用。手術結束后,用溫生理鹽水紗布覆蓋創面。
(二)腹部手術:尿液收集方法選擇膀胱導尿法。
自恥骨聯合上緣向上沿正中線作4厘米長皮膚切口,再沿腹白線剪開腹壁及腹膜,找到膀胱,將膀胱翻至體外。再于膀胱底部找出兩側輸尿管,認清兩側輸尿管在膀胱開口的部位。小心地從兩側輸尿管下方穿一絲線,將膀胱上翻,結扎尿道。然后在膀胱頂部血管較少處剪一小口,插入膀胱漏斗,用線結扎固定,漏斗口應對著輸尿管開口處并緊貼膀胱壁。膀胱漏斗另一端用導管連接至記滴器。
三、 儀器 連接及參數設置(MS2000)
(一)將壓力換能器接在2通道,尿滴記錄線接至3通道。設置相應通道并調零。
(二)刺激器設成"連續刺激",串間隔10ms,強度3.0v,波寬1ms,波間隔10ms,串長1。
(三)若尿滴有明顯的漏記現象,可加快顯示速度,然后選擇適當的“橫向壓縮”調整顯示。
四、觀察項目
(一)記錄一段正常血壓曲線和尿液滴數。
(二)耳緣靜脈注射38℃生理鹽水15~20ml,觀察血壓和尿量的變化。
(三)靜脈注射l:10000的去甲腎上腺素0.2~0.3ml,觀察血壓和尿量的變化。
(四)取尿液2滴至裝有lml班氏 試劑 的 試管 中,在酒精燈上加熱作尿糖定性試驗。然后靜脈注射38℃的50%葡萄糖5ml,觀察尿量的變化,當尿量明顯增多時,再取尿液2滴作尿糖定性試驗。
(五)結扎并剪斷右側迷走神經,用中等強度的脈沖電流刺激其外周端20~30s,使血壓降至50mmHg左右,觀察尿量的變化。
(六)靜脈注射呋塞米(5mg/kg),觀察尿量和血壓的變化。
[注意事項]
1.實驗前給兔多喂菜葉,或用橡皮導尿管向兔胃內灌水50ml,以增加基礎尿量。
2.注意術中不要擠壓膀胱。
3.注意不要誤扎輸尿管。