trizol法提取血中的RNA,怎樣做量會更多?
關鍵詞: trizol 提取 血中 rna來源: 互聯網
問:trizol法提取血中的RNA,怎樣做量會更多?提完RNA加DEPC水后放-80度也會容易講解嗎? 答: 1 血要新鮮。如果是凍存的,在解凍時要完全,之后再加Trizol。 2 可以稍多加一些Trizol,少加些血。混勻之后放置10分鐘左右,直接加三氯甲烷,混勻再去離心。 可以不用先離心去沉淀之后再加三氯甲烷。 3 每個步驟操作要快,用的時間藥短些,防止降解. 4 異丙醇沉淀的時候,放-20°C的冰箱半個小時,或再適當延長一點時間。迅速離心,之后加75%乙醇。只洗一遍,洗2遍易損失部分RNA。 5 不要過分干燥,管內稍有點殘余的乙醇也沒關系。干燥一會就迅速加DEPC水少量。一般我都加的30.如果需要濃度高點可以少加水。 6 提取RNA之后迅速反轉錄成cDNA再保存。 RNA直接凍存會降解。也會影響以后反轉的效率。 (責任編輯:大漢昆侖王) |
推薦方法
- RNA提取注意事項
- Pulse-Chase mRNA decay assay in HeLa Tet-off cells:
- 哺乳動物細胞中進行RNA干擾:設計,實驗和分析siRNA效應
- 96-well?RNA?In?Situ?Hybridization?Protocol
- Northern雜交試驗指導手冊-為制備RNA探針模板的DNA片斷亞克隆
- C.?elegans?RNA?prep
- Increasing?Your?RNA?Recovery?During?Tissue?or?Cell?Extraction
- In?situ?hybridization?of?yeast?cells?(RNA?and?Oligonucleotide?probes)
- Protocol?of?Northern?blot
- Hiro?Hirai?PRINS?Protocol