苦于多基因 or LncRNA 敲除的同學 你的福音來啦
我們都知道基因剪刀 CRISPR/CAS9 技術今年大火,之所以這個技術這么火和其對基因操作的方便性,高效性,準確性及高性價比是分不開的。CRISPR/Cas9 是一種能夠對任何物種基因組的特定位點進行精確編輯的技術。
其原理是核酸內切酶 Cas9 蛋白通過導向性 RNA (guide RNA, gRNA) 識別特定基因組位點并對雙鏈 DNA 進行切割。一旦 DNA 鏈被切開后就能對特定基因引入敲除、敲入、突變等編輯。
然而基于傳統的 sgRNA 載體的 CRISPR-CAS9 技術,由于僅靶向一個位點,所以更適合單個編碼基因的敲除,對于多個編碼基因和非編碼基因則需要同時導入多個 sgRNA 載體/病毒,使操作難度上升不小。
為解決多個編碼基因同時敲除和 lncRNA 敲除的需求,Multiplex sgRNA 技術應運而生Multiplex sgRNA system 可同時插入不同的 sgRNA,幫助解決同時敲除多基因或非編碼基因編輯的需求。可以同時插入 2~5 個 sgRNA 符合不同的實驗需求。針對多個編碼基因其敲除策略可以為:
對于通路研究的同學來說,有時需要同時抑制多個通路,而通路抑制劑還是蠻貴的,如果有了可靠的通路關鍵基因的 sgRNA 序列,那就可以像通路抑制劑一樣使用 CRISPR/CAS9 技術來同時抑制多個信號通路了,大大提高了性價比。
對于 Car-T 研究的同學來說,編輯 T 細胞制作 UCAR-T 的時候需要同時敲除多個檢查點基因使得 CAR-T 細胞標準化和可量產化,這時同時導入多個 sgRNA 就可以方便的滿足這一要求。還有其他苦于類似特殊高實驗要求的同學們的福音來啦,吉凱基因已經推出了 Multiplex sgRNA system,只要一個 sgRNA 載體,同時插入最多 5 個 sgRNA 靶點,符合最多 5 個基因和 2 個 lncRNA 的敲除工作,是不是感覺棒棒噠!