在制作酶譜、測定序列、制備探針等實驗中需要高純度、高濃度的質粒DNA,為此需要大量提取質粒DNA。

許多年來，一直認為在氯霉素存在下擴增質粒只對生長在基本培養基上的細菌有效，然而在帶有pMBl或ColEl復制子的高拷貝數質粒的大腸桿菌菌株中，采用以下步驟可提高產量至每500ml培養物2-5mg質粒DNA，而且重復性也很好。

1、將30ml含有目的質粒的細菌培養物培養到對數晚期（OD600約0.6)。培養基中應含有相應抗生素，用單菌落或從單菌落中生長起來的小量液體閉關物進行接種。

2、將含相應抗生素的500ml LB或Terrific肉湯培養基（預加溫至37℃）加入25ml對數晚期的培養物，于37℃劇烈振搖培養2.5h（搖床轉速300轉/分），所得培養物的OD600值約為0.4。

3、可做可不做：加2.5ml氯霉素溶液（34mg/ml溶于乙醇）， 使終濃度為170μg/ml。有些質粒只要生長達到，新一代的質粒（如pUC質粒）可復制到很高的拷貝數，因此無需擴增。但像pBR322一類在宿主菌內只以中等拷貝復制質粒，有必要擴增。用氯霉素進行處理，具有抑制細菌復制的優點，可減少細菌裂解物的體積和粘稠度，極大地簡化質粒純化的過程。所以一般說來，盡管要在生長中的細菌培養物里加入氯霉素略顯不便，但用氯霉素處理還是利大于弊。

4、于37℃劇烈振搖（300轉/分），繼續培養12-16小時。

5、用Sorvall GS3轉頭（或相當的轉頭）于4℃以4000rpm離心15min，棄上清，敞開離心管口并倒置離心管使上清全部流盡。將細菌沉淀重懸于100ml用冰預冷的STE中。【STE：0.1mol/L NaCl 10mmol/L Tris.Cl(pH8.0) 1mmol/L EDTA(pH8.0) 5% Triton X-100】按照前面所述收集細菌細胞。