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    羅氏蛋白親和純化樹脂:cOmplete His-Tag Purificatio

    關鍵詞: 羅氏 蛋白 親和來源: 互聯網

    cOmplete His-Tag Purification Resin

    靈活純化蛋白、保證效能 選擇靶蛋白適宜的緩沖條件 cOmplete His-Tag Purification Resin是一種新型的高效能IMAC基質,用于裂解液中His標簽蛋白的一步法純化,操作方便。采用羅氏特殊的鎳螯合化學技術,該純化樹脂與常用的還原劑(如DTT )、金屬蛋白酶螯合抑制劑(如E DTA)兼容,適用于廣泛底物及鹽濃度的緩沖條件。

    基于這種很強的組分兼容性,您可靈活地優化緩沖條件,以保持蛋白質的高度穩定性及溶解度,保護蛋白不被蛋白酶降解及避免被氧化。 使用DTT 與EDTA穩定您的蛋白

    靈活使用含E DTA或DTT 的緩沖液,在不降低純化效能的情況下,保持蛋白的高度穩定性。 獲得大量高純度蛋白質

    樹脂的高結合效能與結合特異性是一步法純化蛋白的必備條件。 毒性廢物排出顯著降低

    鎳脫落量極少,大大減少了毒性廢物量,并避免了鎳離子重新螯合填料的麻煩。 減少鎳脫落 與氨基三乙酸(NTA )樹脂或亞氨基二乙酸(IDA )螯合樹脂不同,cOmplete His-Tag Purification Resin 是通過一種特殊的化學技術,使用一種強效螯合劑將鎳離子固定化獲得的。 即使在E DTA與DTT 存在的條件下,鎳離子的脫落量也極少,避免重新螯合填料的需要。

    結果:孵育期間,cOmplete His-Tag Purification Resin鎳離子脫落率小于1%。而采用不同螯合劑的兩種樹脂,鎳離子釋放至緩沖液中的量分別高達76% 與59% 。

    避免頻繁的柱再生操作

    隨心所欲地進行靶蛋白合適的緩沖條件的選擇,無需擔心會降低樹脂的穩定性。使用含還原劑(如DTT )與/ 或金屬蛋白酶抑制劑(如E DTA)的緩沖液,不會改變cOmplete His-Tag Purification Resin的效能。得益于新型螯合劑的作用,鎳離子與樹脂緊密結合。

    結果:即使在嚴苛的緩沖條件下,5 次蛋白純化操作中,cOmplete His-Tag Purification Resin 依然可保持其穩定性,無需進行鎳離子的更新螯合。

    使用高效能樹脂,獲得高性價比

    純化柱對蛋白的結合效能主要取決于靶蛋白特性:如靶蛋白分子量、Stokes 半徑、結合條件與添加組分。cOmplete His-Tag Purifcation Resin的設計是對經濟性及高純化性能的極佳平衡。在樹脂中裝載過量蛋白會導致蛋白質不穩定。cOmplete His-Tag Purification Resin對小分子蛋白的結合量最大。蛋白質分子越大,處理載量隨之降低。

    和其他任何樹脂一樣,cOmplete His-Tag Purification Resin 對蛋白的結合效能呈現時間依賴性。延長孵育時間可獲得更高效能。

    獲得高度純化蛋白

    cOmplete His-Tag Purification Resin是一種基于Sepharose瓊脂糖、預帶電荷的、即用型N i2+- 螯合基質,用于His標簽蛋白的實驗室分析及大規模純化。通過粗裂解液的一步純化處理,即可獲得高純度目標蛋白。僅單次純化操作即可獲得理想的蛋白純度。

    結果:僅一次純化操作,cOmplete His-Tag Purification Resin即可生成高度純化的靶蛋白。

    避免進行毒性鎳溶液處理

    Ni2+ 具有生物毒性,并且是一種已知致癌劑。鎳對帶有氧、氮與硫供體的配基具有高度親和性,因此會影響酶及DNA的功能。鎳的化學結構類似于鋅,鋅是多種酶的輔基,當鎳占據鋅結合位點時,酶功能將受到很高程度的影響。鎳過量還可導致肺癌、鼻癌及骨肉瘤的發生。

    在cOmplete His-Tag Purification Resin 中,由于其使用的Ni 螯合劑的獨特化學特性,樹脂上結合的金屬離子得到保護,防止還原劑的結合。因此,該純化柱的鎳脫落率降至極低,也不需要進行頻繁的再生循環(包括使用鎳溶液進行重新螯合),可顯著降低毒性鎳溶液處理的風險,降低有毒廢液的處理成本與環境危害。

    (責任編輯:大漢昆侖王)
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