溴化乙錠EB凈化與處理方法
EB是我們從事生命科學尤其是分子生物學經常要接觸的致癌性物質,且不好處理.現提供如下方法。
一、嚴禁隨便丟棄。
因為EB是強致癌性,而且易揮發,揮發至空氣中,危害很大。
二、廢EB溶液的處理方法
1.溴化乙錠濃溶液(即濃度大于0.5mg/ml的溴化乙錠溶液)的凈化處理
方法Ⅰ:用沙門氏菌微粒體測定法。本方法可使EB的誘變活性降至原來的1/200左右。
①加入足量的水使EB的濃度降低至0.5mg/ml以下:
②在所得的溶液中加入0.2體積的新配制的5%次磷酸和0.12體積的新鮮配置的0.5mol/L亞硝酸鈉,小心混勻。切記:檢測該溶液的pH值應小于3.0,市售次磷酸一般為50%溶液,具有腐蝕性。應小心操作。必須在臨用前現用現稀釋。亞硝酸鈉溶液(0.5mol/L)的配法:用水溶液34.5g亞硝酸鈉并定容至終體積500ml,現用現配。
③于室溫溫育24小時后,加入大大過量的1mol/L碳酸鈉。該溶液可予丟棄。
方法Ⅱ:用沙門氏菌微粒體測定法檢查,經用本方法處理后,可使EB的誘變活性降低至原來的1/3000左右。但也有報告稱,在用凈化溶液處理的空白樣品中,偶爾有一些仍具有誘變活性。
①加入足量的水使EB的濃度降低至0.5mg/L以下;
②加入1倍體積的0.5mol/LKMnO4,小心混合后再加入1倍體積的2.5mol/LHCl小心混勻,于室溫放置數小時;
③加入1倍體積的2.5mol/LNaOH小心混合后可丟棄該溶液。
2.EB稀溶液(如含有0.5ug/mlEB的電泳緩沖液)的凈化處理
方法Ⅰ:
①每100ml溶液中加入2.9gAmberliteXAD-16,這是一種非離子型多聚吸附劑,可向Rohm&Haas公司購置;
②于室溫放置12小時,不時搖動;
③用Whatman1號濾紙過濾溶液,丟棄濾液;
④用塑料袋封裝濾紙和Amberlite樹脂,作為有害廢物予以丟棄;
方法Ⅱ
①每100ml溶液中加100mg粉狀活性炭;
②于室溫放置1小時,不時搖動;
③用Whatman1號濾紙過濾溶液,丟棄濾液;
④用塑料袋封裝濾紙和活性炭, 注:用次氯酸(漂白劑)處理EB稀釋液并不可取;
EB在262℃分解,在標準條件進行焚化后不可能再有危害性;AmberliteXAD-16或活性炭可用于凈化被EB污染的物體表面。
三、EB接觸物
1.如抹布,槍頭。 一般回收至黑色的玻璃瓶中,定期進行焚燒處理。
2.電泳膠 膠里面痕量的EB沒有問題,如果小于0.1%可以直接扔掉。而如果發紅,即大于等于0.1%時應該放在生物危害柜中焚燒掉。
3.手套、設備等物品 放在醫用垃圾中焚燒,如污染嚴重則用漂白劑處理。
EB的凈化處理方法 小心:溴化乙錠是強誘變劑,并有中度毒性。取用含有這一燃料的溶液時務必戴上手套。