【實驗技巧】麗春紅染色
關鍵詞: 蛋白表達來源: 英文特
麗春紅(Ponceau S)染色是 WB 實驗中的一個重要環節,今天就來給大家詳解麗春紅染色的作用和操作方法。
麗春紅染色作用
可用于 PVDF 膜,硝酸纖維素膜和和醋酸纖維素膜上的蛋白的檢測。
麗春紅染色原理
麗春紅帶負電荷,可以與帶正電荷的氨基酸殘基結合,同時麗春紅也可以與蛋白的非極性區相結合,從而形成紅色的條帶。
麗春紅特性
麗春紅對蛋白的染色是可逆的,染色后可以用蒸餾水,PBS 或其它適當溶液洗去。
為什么要用麗春紅染色?
通過麗春紅染色可驗證轉膜效率,及每孔上樣蛋白總量是否均等,可以幫助后續實驗進行內參調整或問題分析。
特別說明:麗春紅染色液不適用于尼龍膜上的蛋白檢測。
操作方法
1. 將轉印膜浸沒在麗春紅染色液中,用搖床孵育轉印膜 1-30 分鐘。
2. 取出轉印膜,用去離子水沖洗膜直到背景干凈(通常不超過 5 分鐘),條帶清晰,記錄結果。染液可以繼續用去離子水洗滌完全去除麗春紅,進行后續的 WB 檢測。
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