膜蛋白具有許多重要的細胞功能，對生物體存在至關重要。他們具有超過 60% 的藥物靶點，占細胞總蛋白的 20%-30%。膜蛋白包括完整的膜蛋白，跨膜蛋白和外周膜蛋白。膜蛋白或者附著在脂質雙分子層上或者通過疏水，離子或其他非共價與膜周邊的完整蛋白結合。 ? ? ? ? ? 使用表面活性劑進行質膜蛋白分離有可能破壞蛋白質-蛋白質相互作用，改變膜蛋白的拓撲結構。在一些下游應用中，例如膜蛋白 IP，Co-IP，酶檢測，質譜分析實驗，使用無表面活性劑的方法分離質膜蛋白遠遠好過使用表面活性劑的方法。多年來，已經開發了許多使用無表面活性劑方法提取質膜蛋白。大致可以分為以下三類方法： ? A．傳統的蔗糖梯度離心（SGU）：傳統的蔗糖梯度離心法自上世紀 60-70 年代開發，至今仍被許多實驗室用于質膜蛋白提取，蔗糖梯度離心可以將細胞蛋白分離成不同的組分和高度濃縮的膜蛋白。這種傳統的方法需要大量的起始材料，操作過程復雜耗時。 ? B．雙水相親和性分離：此方法的特點是大多數的親水性聚合物對在水溶液中是不相容的，產生兩個共存相，相互平衡。利用這個性質可以分離許多生物分子包括膜蛋白。該方法相對簡單，快速，但是所需的起始細胞數相對較高（大于 100 萬/樣本），且產量相對較低。 ? C．離心管柱法：在過去兩年里，一種新興的技術，即使用離心管柱專利技術分離膜蛋白開始普及。離心管柱帶有特定孔徑和表面性質，當細胞通過離心管柱，細胞膜被破裂分離出完整的細胞核，隨后通過差速離心分離出質膜蛋白。 ? 傳統的蔗糖梯度離心和雙水相親和性分離方法都需要通過特殊設備（勻漿機，攪拌機或超聲波）勻漿來打破細胞膜，使用勻漿設備無法避免由于力度和時間不同造成的人為誤差，是實驗間差異的主要來源。相比之下，使用離心管柱法提取膜蛋白，不需要使用任何勻漿設備，起始材料僅需 1*106 個細胞，并且試劑盒不使用表面活性劑，操作簡便，速度快，性能好，離心管柱法提取膜蛋白將成為越來越多研究人員的正確選擇！