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  • 實驗方法> 蛋白質技術> 蛋白質含量測定>血漿游離血紅蛋白測定

    血漿游離血紅蛋白測定

    關鍵詞: 血漿,血紅蛋白,測定來源: 互聯網

    實驗原理

    血紅蛋白具有類過氧化物酶活性,可催化H2O2釋放新生態氧,使鄰甲聯苯胺氧化發生顏色變化,由無色最終變為藍紫色。根據顯色深淺與標準進行比較,可測出其含量。

    實驗方法

    材料:

    1.2g/L鄰甲聯苯胺溶液

    2.1%H2O2

    3.10%醋酸溶液

    4.分光光度計

    方法:

    1.抽取靜脈血2-3ml,枸櫞酸鈉抗凝,離心分離血漿。

    2.按下表進行操作,用分光光度計,波長為530nm,以空白管調零,測定測定管的吸光度。

    試劑 (ml) 測定管 空白管
    2 g/L鄰甲聯苯胺溶液 0.5 0.5
    患者血漿 0.02 /
    1% H2O2 0.5 0.5
    混勻后室溫放置10min
    10%醋酸溶液 5.0 5.0
    室溫放置10min

    3.計算公式

    血漿游離Hb(mg/L)=測定管吸光度/標準管吸光度×100 實驗結果計算

    參考范圍:0-40mg/L

    注意事項

    1.一切容器避免血紅蛋白污染; 2.采血要順利,器皿要干燥,檢測血漿要新鮮,及時分離,防止人為溶血; 3.鄰聯苯胺溶液具致癌性,檢測時要小心,廢液要妥善處理,以免污染; 4.雙氧水要新鮮配置,濃度要準確。

    推薦方法

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