蛋白的裂解與提取方法步驟
關鍵詞: 蛋白 裂解 提取來源: 互聯網
這是偶整理的蛋白裂解和提取的protocol,希望對大家有所幫助。 10ml 三去污裂解液配方如下: 50 mmol/L Tris-cl (pH 8.0): 0.07882g 150 mmol/L NaCl: 0.08775g 0.2 g/L疊氮鈉: 0.002g 1 g/LSDS 0.01g 100 mg/L Aprotin 0.001g 10 g/L NP-40 0.1g 5 g/L去氧膽酸鈉 0.05g 100 mg/L 苯甲基磺酰氟(PMSF) 0.001g 總蛋白 抽提程序: 1.PBS洗細胞3 次 2.加入裂解 緩沖液 (1.5x106個細胞大約加入100μL 裂解液,或100ml細胞瓶中加入100μL 裂解液), 冰上放置20min 3.收集裂解液 4.離心,12000轉,2~10min 5.吸取上清,蛋白定量,分裝,保存在-80度備用
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