放射免疫分析RIA法的影響因素

　　pH和離子強度；反應溫度，溫度一般為37℃，也有45℃，室溫，4℃ 冰箱；反應時間，操作中的注意事項：戴手套、防護鏡等，將試劑盒從冰箱中取出，室溫下放置30 min方可使用。

　　（1）編號：第一排是標準管：根據標準品濃度由低到高A，B，C，D，E，F，G……；第二排是被測樣品1，2，3，4，5，6，……。

　　（2）加樣要準確，移液器的使用（兩個檔位，一檔吸人，二檔排出）吸頭（一個標本一個吸頭，避免互相污染）。加試劑：先看瓶簽，再搖勻，最后吸人。（標記物一般為紅色，一抗為蘭色）。

　　（3）溫育時間要保證：按說明書中所要求的時間溫育，可以延長，不能縮短。

　　（4）分離劑加入：混勻靜置時間，可以延長，不能縮短。保證抗原抗體復合物與第二抗體的充分結合。

　　（5）溫度：注意觀察水浴箱的水溫，誤差不能太大，為±1℃ ，室溫21℃左右。

　　（6）離心時間：也應按說明書中所要求來操作，轉速一般為3 500r/min。往離心機里放反應管時，盡量讓它直立（因為傾斜可能會使液體流出）。吸上清液時，沉淀物在試管底部，真空泵的吸頭頭部不能直接插人到試管底部中央（會吸走沉淀物，而我們的目的是分離保留沉淀物），應該使吸頭貼著試管管壁往下放，并且試管要稍微傾斜，但要在即將插到沉淀物邊緣時停止，快速上升取出。少留一點點上清液也可。主要是保證沉淀物完整。

　　（7）進人免疫計數器測量時，注意觀察做出的曲線好壞：是不是需要修改，剔除壞點。

　　（8）報結果：碰到異常結果，要再次看一看沉淀物是否都在，患者情況如何，結果是否與患者情況相符，方可報出。非競爭性RIA法中，清洗固相包被珠時，清洗次數要嚴格按說明書中所要求來操作，不得減少。雖然RIA法的影響因素很多，但操作中只要注意上述事項，RIA法的穩定性還是相當不錯的。主要是它存在放射污染，這個問題不易解決，影響了它以后的發展，如今電化學發光免疫分析，化學發光免疫分析，酶聯免疫分析，磁酶免疫分析等相繼推出，發展很快。RIA法將被淘汰。