血清蛋白的醋酸纖維薄膜電泳
一、實驗目的 1.掌握電泳法分離血清蛋白質的原理。 2. 掌握血清蛋白醋酸纖維素薄膜電泳的操作方法。 3.測定人血清中各種蛋白質的相對百分含量。 二、實驗原理 帶電粒子在電場中向與其電性相反的電極方向泳動的現象稱為電泳。血清中各種蛋白質的等電點在pH4.0~7.3之間,在pH8.6的緩沖溶液中均帶負電荷,在電場中向正極泳動。血清中各種蛋白質的等電點不同,所以帶電荷量也不同。此外各種蛋白質的分子大小各有差異,因此在同一電場中泳動的速度不同。分子小而帶電荷多者,泳動較快;反之,則較慢。 采用醋酸纖維素薄膜為支持物的電泳方法,稱為醋酸纖維素薄膜電泳。該膜具有均一的泡沫狀結構(厚約120μm),滲透性強,對分子移動的阻力很弱。用其作支持物進行電泳,具有微量、快速、簡便、分離清晰、對樣品無吸附現象等優點。現已廣泛用于血清蛋白、糖蛋白、脂蛋白、血紅蛋白、酶的分離和免疫電泳等方面。 經醋酸纖維素薄膜電泳可將血清蛋白按電泳速度分為5條區帶,從正極端依次為清蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β球蛋白及γ球蛋白,經染色可計算出各蛋白質的百分含量。 三、實驗器材 1. 電泳儀:為電泳提供直流電源。 2. 電泳槽:為電泳提供場所。多用有機玻璃制成,電極用鉑絲。 3. 血清加樣器 :可用蓋玻片或X膠片或微量加樣器。 4. 醋酸纖維素薄膜:2cm×8cm 5. 其它: 培養皿(直徑9-10cm)、濾紙、玻璃板、鑷子等。
DYY-5型穩壓穩流電泳儀
DYY-Ⅲ型電泳槽
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