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Western Blot 實驗試劑選購指南
關鍵詞： Western Blot 實驗試劑來源： 互聯網
(一)蛋白質電泳
1.請參照常規電泳操作.
2.分子量標準:
可選擇普通分子量標準或預染的分子量標準.在選擇預染的分子量標準時,要注意其優點和缺點:
優點: 在電泳過程中可監控蛋白質分離狀態; 可指示轉印中蛋白質的轉印效率.
缺點: 染料影響蛋白質移動速度;分子量測定略欠精確;影響蛋白質與膜的結合力.
購買信息:
| 中范圍蛋白質分子量標準(14.3-97.4KD) | V5235S | 200μg | 國產 | 80元 |
| 分子量大小:（14.3、21.5、31、40、42.7、55、66.2、97.4KD） | ||||
| 中范圍蛋白質分子量標準(24-97KD) | MTB087-1 | 20次 | 國產 | 80元 |
| 分子量大小:（24、36、53、66、97KD） | ||||
| 低范圍蛋白質分子量標準（6.5-66KD） | M3913-1 | 20次 | Sigma | 280元 |
| 低范圍蛋白質分子量標準（6.5-66KD） | M3913-1 | 5×20次 | Sigma | 1198元 |
| 分子量大小:（6.5、20、24、29、36、45、66KD） | ||||
| 高范圍蛋白質分子量標準（36-205KD) | M3788-1 | 20次 | Sigma | 280元 |
| 高范圍蛋白質分子量標準（36-205KD) | M3788-1 | 5×20次 | Sigma | 1198元 |
| 分子量大小:（36、45、55、66、84、97、116、205KD） | ||||
| 寬范圍蛋白質分子量標準（6.5-205KD) | M4038-1 | 20次 | Sigma | 280元 |
| 寬范圍蛋白質分子量標準（6.5-205KD) | M4038-1 | 5×20次 | Sigma | 1266元 |
| 分子量大小:（6.5、14.2、20、24、29、36、45、55、66KD） | ||||
| 預染的低范圍蛋白質分子量標準(18-80KD) | 20次 | 自產 | 320元 | |
| 預染的低范圍蛋白質分子量標準(18-80KD) | 50次 | 自產 | 680元 | |
| 分子量大小: 80, 60, 39, 23, 18 kDa | ||||
| 預染的中高范圍蛋白質分子量標準(20-210KD) | 20次 | 自產 | 320元 | |
| 預染的中高范圍蛋白質分子量標準(20-210KD) | 50次 | 自產 | 680元 | |
| 分子量大小:210, 140, 106/102, 80, 52, 20 kDa | ||||
| 預染的中高范圍蛋白質分子量標準(18.3-210KD) | 26681 | 48次 | Pierce | 1214元 |
(二)蛋白質轉印
a)膜的選擇:主要采用 NC膜和PVDF膜,其比較如下:
| NC膜 | PVDF膜 | |
| 物理強度 | 差 | 好 |
| 蛋白質結合能力 | 80-100ug/cm2 | 100-200ug/cm2 |
| 溶劑耐受力 | 無 | 有 |
| 考馬斯亮蘭染色 | 否 | 可以 |
| ECL檢測 | 稍差 | 可以 |
| 快速免疫檢測 | 否 | 可以 |
| SDS存在下蛋白質結合 | 差 | 好 |
| 質譜分析 | 否 | 可以 |
(尼龍膜和NC膜的特點相似,主要用于核酸雜交)
b)膜的大小: 請根據膠的面積來確定.
c)膜的孔徑: 0.45μm適用一般蛋白質.0.2μm適用小分子蛋白質.
購買信息:
| 66485 | 硝酸纖維素膜,0.45um,30cmX3m/卷 | 美國Gelman | 1395元/卷 |
| 硝酸纖維素膜,0.45um,20cmX20cm | 美國Gelman | 80元/張 | |
| 硝酸纖維素膜,0.45um,20cmX20cm | 國產 | 30元/張 | |
| 60207 | 尼龍膜, 0.45um,30cmX3m/卷 | 美國Gelman | 2310元/卷 |
| 尼龍膜, 0.45um,20cmX15cm | 美國Gelman | 90元/張 | |
| 尼龍膜, 0.45um,直徑100mm,50張/盒 | 國產 | 260元/盒 | |
| 66543 | PVDF膜, 0.45um,30cmX3m/卷 | 美國Gelman | 1690元/卷 |
| PVDF膜, 0.45um, 直徑100mm,50張/盒 | 國產 | 260元/盒 |
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