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    上海阿拉丁生化科技股份有限公司

    20210330 蛋白純化與分析檢測技術


    2021年03月30日 09:30

    2021年03月30日 11:30

    江正瑾,吳若瑜,徐穎,米建秋

    安捷倫科技(中國)有限公司 布魯克(北京)科技有限公司-質譜儀器

    生命科學  制藥  臨床  


    內容簡介

    蛋白質是生物體含量豐富、功能復雜、種類繁多的生物大分子,其分離純化方法已成為目前的研究熱點之一。蛋白質在人們身體健康方面發揮著重要作用,并在各個領域中不斷被廣泛涉獵,其中較為突出的為醫學領域和食品安全領域。蛋白質在功能方面極具特異性,換而言之,每一功能的特異性都將帶來差別頗大的功效。因此,對蛋白純化的相關研究進行分析探討,具有重要的現實意義。

    本次研討會,分析測試百科網將邀請行業專家,與大家共同探討蛋白純化與分析檢測技術,希望能對行業內工作者帶來幫助和啟發。

    【日程安排】

    時間
    報告人
    單位
    報告題目
    09:30-10:00
    江正瑾 教授
    暨南大學藥學院
    基于表位模擬肽的單克隆抗體藥物富集純化方法研究
    10:00-10:30
    吳若瑜
    布魯克質譜
    4D-蛋白質組學技術應對蛋白質純化中微量樣本的檢測挑戰
    10:30-11:00
    徐穎 副教授
    南京農業大學生命科學學院
    重組蛋白的表達與純化策略
    11:00-11:30
    米建秋
    安捷倫
    選擇合適的色譜柱進行蛋白類生物治療藥物的LCMS分析

    【報告簡介】

    基于表位模擬肽的單克隆抗體藥物富集純化方法研究

    復雜生物體系中單克隆抗體的快速精準捕獲對于降低抗體藥物的生產成本和推動其臨床個體化用藥均具有重要意義。本研究受“抗原-抗體”作用的啟發,針對抗體的不同特定位點(Fc區或Fab區)分別設計開發了Fc-仿生親和肽和靶抗原表位模擬肽,并利用金屬螯合等固定技術,將仿生肽高密度固定在聚合物基質表面,研制出不同仿生肽功能化聚合物材料。以乳腺癌治療單抗Trastuzumab為例,我們設計開發出其靶抗原HER2的表位模擬肽HH24功能化聚合物材料,研究發現該材料能高效避免hIgG的干擾,從而精準識別人血樣中目標抗體藥Trastuzumab,而且對復雜體系中的其它雜蛋白和干擾物質表現出非常強的抗非特異性吸附能力。最后,利用該材料結合熒光分光光度法開發了新型Trastuzumab定量分析方法,并用于乳腺癌患者血清樣品中Trastuzumab的快速定量分析。在此基礎上,將特異性多肽識別理念拓展應用于非霍奇金淋巴瘤患者體內Rituximab 的多肽生物傳感器的構建與臨床應用,闡明了表位模擬肽識別技術的可拓展性。

    4D-蛋白質組學技術應對蛋白質純化中微量樣本的檢測挑戰

    微量蛋白質樣本的檢測對現今分子病理相關研究(如血漿、組織樣本及穿刺樣本檢測)、新藥開發、蛋白藥物質量監控(如蛋白藥物宿主殘留蛋白分析)等十分重要,蛋白質樣本不像基因可以透過PCR進行擴增,因此微量蛋白樣本分析除考慮前端純化方法開發外,亦必須考慮后端分析技術。基于布魯克timsTOF Pro的4D蛋白質組學技術大幅度提高的峰容量、掃描速度和檢測靈敏度,帶來了蛋白質檢測深度、檢測周期、定量準確性等的全面提升,4D蛋白質組學技術已成為微量蛋白樣本分析強有力的工具,可以很好地應對蛋白質純化中微量樣本的檢測挑戰。

    選擇合適的色譜柱進行蛋白類生物治療藥物的LCMS分析

    在蛋白類生物治療藥物的的液相色譜質譜聯用分析中,既需要考慮液相色譜的分離效率,也需要考慮質譜的響應。在流動相選擇范圍相對有限的前提下,如何選擇合適的液相色譜柱是影響實驗結果的關鍵因素之一。本節內容從以上問題出發,系統性討論了反相色譜及尺寸排阻色譜與質譜聯用分析蛋白類生物治療藥物的策略與實驗細節。

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