由生手轉變成相對熟手全過程—使用TSQ finnigan液相質譜心得以及維護體會

      由于課題的原因，得以用上TSQ finnigan 液相質譜聯用儀。這臺儀器也沒買多久，實驗室參加工程師培訓的就一兩個，而且我也沒趕上。起始沒有一個很清晰的認識，一開始總的認識是液相質譜與液相的區別是檢測器的不同，液相質譜的是質譜檢測器，而液相的則是紫外檢測器等，周圍的人多是這么說的。只能跟著會的人打打下手，在旁邊看看，沒有操作儀器的機會，因為老師怕儀器受到損害，一百多萬的東西畢竟看起來很精貴。在這種情況下，我覺得首先了解液相質譜的一些基本原理、熟悉該儀器的操作軟件是至關重要的。剛好老師給了我工程師參加培訓時留下的幻燈片，我就死啃幻燈片，第一遍是看不太懂的，里面理論的東西很多，而且很多東西就要試著記下，后來看了好多遍才慢慢熟悉起來。基本上搞清楚了是怎么回事，可是實際操作與此相差很大，因為幻燈片上的東西講的都太全，甚至根本用不上，而且看了也太懂不明白，只是達到了熟悉軟件和了解基本原理的目的。操作軟件上的東西看起來很復雜而僅僅一部分是需要人為操作的。熟悉軟件知道了那些圖標表示的意思，讓我很快就能上手，不然別人操作半天你在旁邊看也不明白是怎么回事，因為都有試驗任務，也不可能手把手教你，給你講的一清二楚。

      熟悉了軟件以及基本的原理之后就開始慢慢的學著操作了，因為別人在做試驗的時候可以幫著弄弄。一開始還是不太敢碰的，因為畢竟不是很懂。慢慢的知道了怎么排氣泡，然后就是怎么操作液相泵，調流動相的比例。我就列舉幾個我碰到的小麻煩。記得有一次排氣泡的時候忘了擰開那個purge閥，搞的報警著實讓我慌了一下，呵呵，后來打電話問師兄才知道clear那個錯誤才不會叫的。有一次遇到系統壓力不穩的情況，壓力不斷的變化，從低到高，然后又從高到低不斷的跳動，后來把色譜柱卸下來也還是那樣，根本就沒辦法進樣。反復purge了好幾次還是那樣，后來打電話問過工程師，說了很多可能的原因。而我只有撿自己能做的嘗試，原來是因為流動相超聲的時間不夠，因為哪個時候是冬天，以前只需要超聲十幾分鐘，現在必須超聲二十多分鐘，因為天氣比較冷氣泡不容易超盡，當時的卻對于超聲這回事都沒有太在意，還好終于解決了，所以以后我都寧愿超聲時間長一些保險。然后就是質譜那一塊，看著常見的操作就是取下離子源的區域，摘下Ion sweep cone以及離子傳輸管清洗。老師反復強調操作之前必須看一下真空度，要達到4e^-6水平，看看氮氣壓力夠不夠，泵油的位置，這些精煉而使用的前操作似乎成了潛意識一下就能意識到的東西。在直接優化的時候也是個問題，完全不懂優化的過程，因為參數太多，也不是盡要優化的，記住一些關鍵的地方是很重要的。后來看了很多資料，基本了解了各個參數的作用以及優化的目的，才慢慢會看優化的具體過程。也碰到過優化出錯的情況，因為當時氮氣壓力有點低，所以優化出來的鞘氣壓力和輔助氣壓都比較高，超出了應該在的范圍。而且以前也沒有太在意優化的時候標樣必須要達到的強度，因為只有這樣才能保證優化的各參數可靠性。

      可能是我運氣不好，很多棘手的問題都被我碰到了，在走標樣的時候竟然不出峰了，反復嘗試了好多遍都這樣，卸下色譜柱也是這樣，請工程師過來修也一下耽擱了好幾個月的時間。當時過來之后也覺得很奇怪，只能液相、質譜部分一部分的排查，單獨進質譜發現是有信號的，確定是液相那部分的原因，初步估計是液相部分有的地方堵了。然而液相排查的話就必須有配件來更換，所以從進樣針，以及管路、定量環都進行了更換，工程師覺得是自動進樣器的注射泵的問題，因為有很明顯的噪聲，可以看到有明顯的漏液情況，后來搞了很久，因為配件寄錯過一次。同時在此期間我也看了很多關于該儀器結構方面的資料，都是英文的，很具有挑戰性。我邊看邊去實地操作的，因為我也想找找原因，對于這些部分都相當的熟悉了。后來換上之后就好了，在其中還出現過一個小插曲，那就是不知道進樣托盤的類型怎么變動了，成了96孔板的進樣托盤類型，因為不同的托盤類型自動進樣器扎的深淺不一樣，后來調成響應的托盤類型就好了，工程師認為是這個原因導致的沒有信號。可是在此期間，我也確認過這個地方，我覺得還是注射泵的原因才是真正的原因。

      不得不承認的是因為這些遇到的問題，讓我在逼不得已的情況下學習了很多相關的資料，學習到了很多解決問題的方法。如果試驗進行的很順利的話，也許我不會去看去學，所以我覺得遇到問題也不一定是什么壞事吧。

      不想寫的篇幅太長話太多，下面我就簡潔的列出一些操作過程中的體會和維護經驗供大家分享。

操作之前：

（1）查看儀器房間溫度(20～30度)和濕度（40%左右）是否在適宜的范圍，這個一般都是固定了的，不需要管太多，如果遇到幾臺儀器同一房間對溫度要求都很嚴格時就需要協調，見圖1、圖2，改善濕度和減少灰塵的方法可以使用吸濕器和除塵器，見圖3和圖4，如果濕度過高和灰塵均會對儀器內部造成損傷；

圖1 溫濕計

圖2 空調控溫

圖3  除濕器

圖4 除塵器

（2）要查看氣體的壓力是否在適當的范圍包括液氮（要求在0.7MPa左右最好）和氬氣（在0.2MPa左右），見圖5、圖6；

圖5  氬氣壓力表顯示

圖6 氮氣壓力表顯示 右邊

（3）查看真空度Ion Gauge Pressure(Torr)的情況，要求在e-6水平。查看泵油線的水平，要求在最不超過最高線（因為會溢出）和最低線（泵油如果不夠真空度會達不到那么高）之間，見圖7中上下刻度線；

圖7  機械泵油上下刻度線

（4）查看表示離子傳輸管是否堵塞的壓力值Fore pump pressure(Torr)，一般是在1.5以下，如果低于1.0說明離子傳輸管已經堵塞必須清洗。

調諧時：

      保證氣體壓力是滿足要求的，壓力不夠會導致所優化參數虛高而不可靠。所進標樣達到的強度正離子必須在e⁷水平，負離子必須在e⁶水平才能往下繼續優化，否則離子強度不穩會導致優化參數不可靠。一般選擇離子傳輸管溫度為350度，調諧時注意查看所顯示的優化提高的情況，注意會可能會發生的出錯的情況就要重新優化。調諧完后使用高流速甲醇沖洗管路，因為很容易造成污染。

進樣時：

      一般流動相超聲時間要充分，在15分鐘左右，天氣變冷應適當延長時間。必須提前平衡色譜柱，最好設定色譜柱溫度在30～40度以保證色譜柱的穩定，可以通過高流速縮短平衡的時間。

進樣后：

      一定要記得沖洗管路，特別是流動相中使用了緩沖鹽的情況，因為長時間不洗，會造成堵塞嚴重的情況，系統壓力明顯增加，常常不得不對毛細管進行切割。0.2mL/min壓力會達到1800psi左右，正常壓力整個流路也就在1000psi左右，當然與流動相的比例也是關系很大的。首先使用50%甲醇水或乙腈水高流速沖洗，該情況不進質譜，沖洗時間充分后切入質譜對毛細管部分進行沖洗。然后又切至廢液使用純甲醇和乙腈高流速進行沖洗，然后切入質譜對于毛細管部分進行沖洗。這樣做之后發生堵塞的情況幾乎沒有發生。離子傳輸管的溫度要降至200度以延長使用壽命，使用堵頭堵住離子傳輸管口。為了保護機械泵，每個星期振一下半個小時的氣我覺得還是很有必要的。

以下列舉兩個很典型的儀器故障例子：

（1）前不久遇到的儀器鞘氣壓力和輔助氣壓力不受控制故障

      在進行樣品優化過程中突然留意到鞘氣壓力和輔助氣壓力優化出錯，始終以五十多的值出現，然后自己手動調節也不受控制。經過工程師的檢查，發現是電路板的問題，控制鞘氣和輔助氣的電子流量閥出現了故障。在拆下電路板觀看時，發現了一個很小的白色的固體物，是導致電子流量閥產生故障的原因。該物是在換液氮的時候不小心帶入的，因為在換液氮罐的時候為了保證不漏氣使用了白色的密封膠，在擰緊的過程中導致該白色物混入管道，而且平時不小心氣壓過大，對電路板上電子流量閥有極大的損傷。后來只有換了一塊電路板才解決問題的，還好是在保修期，要不然這塊板子要花2萬塊。我想這是大家平時都應該注意的。

（2）遇到機械泵的周圍有油情況，見圖8。

圖8 機械泵周圍出現黃色油狀物

      機械泵的周圍總會出現黃色的油狀物，打掃干凈之后，隔一段時間又會有，我覺得是不是因為沒有振氣所導致，由于泵在運作時溫度相對高而產生的油蒸汽在泵的周圍遇冷，從而形成的油狀物。

（3）遇到的轉子密封圈漏液情況，見圖9。

圖9 轉子密封圈漏液

      當轉換LOAD和INJECT鍵時發現有明顯的液體從孔中流出，因為流動相中常時間使用緩沖鹽而造成的，更換了轉子密封圈后漏夜問題得到解決。

希望大家來批評指正哦！！！