Tubulin聚合檢測（熒光法-96assays 豬腦 tubulin）試劑盒

微管蛋白聚合 HTS 測定使用 >99% 純微管蛋白，基于熒光 （BK011P）。該測定是確定藥物或蛋白質對微管蛋白聚合影響的經濟一步法。它是對最初由Bonne，D.等人描述的測定的改編（1）。聚合之后是熒光增強，因為隨著聚合發生，熒光報告基因被摻入微管中。標準測定使用神經元微管蛋白（Cat.#T240），其產生代表微管形成的三個階段的聚合曲線;即成核、生長和穩態平衡。其他微管蛋白，如HeLa細胞微管蛋白（貨號#H001）也可用于該測定。每次檢測的低體積為50μl，微管蛋白濃度低，最終濃度為2mg/ml（每次檢測100μg），使其成為研究更昂貴的癌細胞微管蛋白試劑和高通量應用比較好的選擇。

艾美捷Tubulin聚合檢測（熒光法-96assays 豬腦 tubulin）試劑盒用途：

用于抗癌化合物的經濟高效的高通量篩選。

測量化合物IC50和微管蛋白特異性的基礎研究。

篩選蛋白質對微管蛋白聚合活性的影響。

藥理學本科/研究生班的教學輔助。

Tubulin聚合檢測（熒光法-96assays 豬腦 tubulin）試劑盒內容：

試劑盒含有足夠的材料，可用于50μl格式的96次測定。包括以下組件：

1.>99%純微管蛋白（#T240）

2.具有熒光報告子的通用微管蛋白緩沖液

3.微管甘油緩沖液（#BST05）

4.GTP溶液（#BST06）

5.紫杉醇陽性對照（#TXD01）

6.半區96孔板。黑色，平底

7.包含詳細協議和廣泛故障排除指南的手冊

Tubulin聚合檢測（熒光法-96assays 豬腦 tubulin）試劑盒示例結果：

與微管蛋白相互作用的化合物或蛋白質通常會改變聚合的一個或多個特征相。例如，圖1顯示了在標準聚合反應中加入抗有絲分裂藥物紫杉醇的效果。3μM濃度的紫杉醇消除了成核階段，并提高了生長階段的Vmax。因此，該測定法的一個應用是鑒定新的抗有絲分裂劑。圖1還顯示了添加微管失穩藥物長春堿的效果。在最終濃度為3μM時，長春堿會導致Vmax急劇降低，最終聚合物質量降低。

圖：使用基于熒光的微管蛋白聚合測定法（BK011P）進行微管蛋白聚合。微管蛋白與紫杉醇或長春堿單獨孵育（對照）。每種情況都測試了兩次。通過在360nm處激發和在420nm處發射來測量聚合。對照聚合曲線標記了微管蛋白聚合的三個階段；I： 成核，II：生長，III：穩態平衡。

文獻參考：

Bonne, D., Heusele, C., Simon, C., and Pantaloni, D.  (1985).  4’, 6-Diamidino-2-phenylindole, a fluorescent probe for tubulin and mictrotubules. J. Biol. Chem. 260, 2819-2825.

https://www.amyjet.com/products/BK011P.shtml