Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒化驗原理&文獻參考

聚ADP-核糖基化（Poly ADP-ribosylation，標準桿數）是真核細胞中的一種翻譯后修飾，可調節修飾后蛋白質的活性，并將其與其他蛋白質結合他們與其他人的互動。這種修飾是由聚ADP核糖聚合酶介導的（PARPs）和ADP核糖基轉移酶2（ART2），其使用煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）作為基底ADP-核糖基化可被PAR降解酶如聚（ADP-核糖）逆轉糖水解酶（PARG）和ADP核糖水解酶3（ARH3）（圖1）。

聚ADP核糖基化參與不同的生物學功能，如致癌、分化以及細胞死亡。ADP核糖基化活性的失調與諸如癌癥、病毒感染和神經變性等疾病。ADPribosation最受研究的作用之一是產生標準桿數鏈以應對DNA損傷。使用這些標準桿數鏈募集修復蛋白和染色質重塑因子。因此，DNA修復過程增強。這可能是腫瘤逃避細胞凋亡的一種機制。最近PARP家族成員在治療某些癌癥方面表現出了希望，有三種藥物可在美國和歐洲買到，主要用于治療BRCA突變卵巢癌癥

圖1：聚ADP核糖基化反應。PARP酶水解NAD+并將ADPribose基團（ADPr）轉移到蛋白質受體上。幾個相互連接的ADPr單元生成一個長帶負電的聚合物。這些聚合物被PARG和ARH3降解。

艾美捷Cell Biolabs Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒#XDN-5114是一種為快速檢測而開發的酶免疫測定試劑盒以及細胞或組織樣本中標準桿數水平的定量。通過比較未知樣品的吸光度和已知標準曲線的吸光度，確定未知樣品中標準桿數的數量。該套件有一個每個試劑盒提供足夠的試劑進行多達96次測定，包括標準曲線和未知樣本。

Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒化驗原理：

Poly（ADP-核糖）ELISA試劑盒是一種夾心ELISA試劑，用于定量測定標準桿數。首先將樣品或標準桿數標準品添加到單克隆抗PAR抗體涂層微孔板中。在短暫培養后，添加抗PAR多克隆檢測抗體，然后添加HRP結合的第二抗體。添加基質后，發生比色反應用比色板讀數器測量。未知樣品中的標準桿數含量由以下公式確定將此吸光度與標準桿數聚合物標準曲線中的吸光度進行比較。

Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒組分：

箱子1（在室溫下裝運）

1.96孔蛋白質結合板（零件號231001）：一個帶孔96孔板

2.抗聚（ADP核糖）涂層抗體（零件號51146C）：一個20μL小瓶

3.抗聚ADP核糖檢測抗體（零件號51142C）：一個15μL小瓶

4.第二抗體，HRP綴合物（1000X）（零件號51143C）：一個15μL小瓶

5.含量測定稀釋劑（零件號310804）：一瓶50 mL

6.10X洗滌緩沖液（零件號310806）：一瓶100毫升

7.基質溶液（零件號310807）：一個12 mL琥珀色瓶子

8.停止溶液（零件號310808）：一瓶12 mL

9.100X PARP抑制劑（零件號51145C）：一瓶3 mL琥珀色3-氨基苯甲酰胺（3-AB）

在二甲基亞砜中為100 mg/mL（735 mM）

箱子2（藍色冰袋裝運）

1.聚（ADP核糖）標準品（零件號51144D）：一個10μL小瓶，2.5μM。

Poly (ADP-Ribose) ELISA試劑盒文獻參考：

1. Miwa, M. and Masutani, M. (2017). PolyADP-ribosylation and cancer. Cancer Sci. 98(10):1528-

35.

2. Lüscher, B. et al. (2018). ADP-Ribosylation, a Multifaceted Posttranslational Modification

Involved in the Control of Cell Physiology in Health and Disease. Chem Rev. 118(3):1092-1136.

3. Martin-Hernandez, K. et al. (2017). Expanding functions of ADP-ribosylation in the maintenance

of genome integrity. Semin Cell Dev Biol. 63:92-101.

https://www.amyjet.com/products/XDN-5114.shtml