2'3'-環GAMP ELISA試劑盒檢測原理&相關試劑盒研究

上一篇 / 下一篇 2023-07-10 16:07:05/ 個人分類：生化試劑

2'，3'-環鳥苷單磷酸-腺苷單磷酸（環GMP-AMP，cGAMP，環[G（2'，5'）pA（3'，5''）p]）是在后生動物中發現的第一個環狀二核苷酸.2'，3'-cGAMP也稱為由于在鳥苷和腺苷。2'，3'-循環GAMP是一種新的先天免疫第二信使調節I型干擾素（IFN）的產生1-6。由cGAS（cGAMP合成酶）在哺乳動物細胞中產生作為對細胞質中雙鏈DNA與cGAS結合的反應，cGAMP與干擾素基因（STING）。隨后STING誘導TBK1-IRF3依賴性IFN-β的產生。

這種cGAS-cGAMP-STING途徑已被證明在病原體檢測和生理狀況，如代謝失調、自身免疫和癌癥7-10。cGAMP的細胞濃度由切割磷酸核苷酸的水解酶控制紐帶其中一種外核苷酸磷酸酶ENPP1是一種鋅刺激的cGAMP水解酶存在于細胞、血清和其他樣品中11。

1. Wu, J., et al. (2012). Cyclic GMP-AMP is an endogenous second messenger in innate immune signaling by cytosolic DNA. Science, 339(6121), 826–30.

2. Sun, L., et al. (2013). Cyclic GMP-AMP synthase is a cytosolic DNA sensor that activates the type I interferon pathway. Science, 339(6121), 786–791.

3. Gao, P., et al. (2013). Cyclic [G(2’,5’)pA(3’,5’)p] is the metazoan second messenger produced by DNA-activated cyclic GMP-AMP synthase. Cell, 153(5), 1094–1107.

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7. Cai, X., et al. (2014). The cGAS-cGAMP-STING pathway of cytosolic DNA sensing and signaling. Molecular Cell 54(2), 289–296.

8. Guo, X., et al. (2017). Cyclic GMP-AMP ameliorales diet-induced metabolic dysregulation and regulates proinflammatory responses distinctly from STING activation. Nature, 7(6355), 1–13.

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10. Bose, D. (2017). cGAS/STING pathway in cancer: Jekyll and Hyde story of cancer immune response. International Journal of Molecular Sciences, 18(11), 2456–2466.

11. Li, L., et al. (2014). Hydrolysis of 2’, 3’-cGAMP by ENPP1 and design of non-hydrolyzable analogs. Nature Chemical Biology, 10(12), 1043–1048.

艾美捷2'3'-環GAMP ELISA試劑盒#K067-H1檢測原理：

DetectX?2'，3'-循環GAMP（cGAMP）免疫測定試劑盒設計用于定量測量存在于裂解的細胞和組織、EDTA血漿和組織培養基樣品中的2'，3'-cGAMP。在進行此測定之前，請閱讀完整的試劑盒說明書。提供2'，3'-cGAMP標準生成用于測定的標準曲線，并且應當從標準曲線讀取所有樣品。清晰提供了用抗體包被以捕獲兔IgG的微量滴定板。標準品或稀釋樣品被移到井中。將2'，3'-cGAMP過氧化物酶綴合物添加到標準品和樣品中在井里。通過將兔多克隆抗體加入2'，3'-cGAMP來引發結合反應每個井。培養2小時后，洗滌板并加入基質。基質反應用結合的2'，3'-cGAMP過氧化物酶綴合物，短時間孵育后停止反應并且在能夠測量450的微量滴定板讀取器中檢測產生的顏色的強度nm波長。在制作合適的樣品后，計算樣品中2'，3'-cGAMP的濃度使用大多數讀板器可用的軟件對樣品稀釋度進行校正。