應用血清蛋白質組分析篩選人胃癌相關抗原

【摘要】背景與目的: 尋找胃癌特異性或相對特異性標志物是胃癌研究亟待解決的課題。本研究利用血清蛋白質組分析方法, 建立人胃癌組織蛋白質雙向凝膠電泳圖譜以及分別與胃癌患者血清和非癌人群血清的免疫印跡圖譜, 初步篩選人胃癌相關抗原。方法: 運用2-DE 分離人胃癌組織的總蛋白質; 一個樣品跑3 塊凝膠, 1 塊考馬斯亮染顯色作為平行膠, 另2 塊分別以胃癌患者自身血清和非癌人群血清作一抗進行免疫印跡分析, 獲得免疫印跡圖譜; 對圖譜進行比較分析, 識別差異反應的蛋白質點, 根據差異反應蛋白質點位置在平行膠上找出匹配的蛋白質點; 對差異反應的蛋白質點應用MALDI-TOF-MS 進行質譜分析鑒定, 獲得相應的肽質指紋圖譜, 通過數據庫搜索鑒定出差異反應的蛋白質。結果: 人胃癌組織2-DE 分離后分別與胃癌患者自身血清和非癌人群血清進行免疫印跡, 獲得分辨率較高的反應圖譜; 圖像分析找出差異反應的蛋白質點14 個, 質譜鑒定獲得hnRNPK、hnRNP H1、hnRNP H2、CK18、Fkbp52 與Hsp90 復合物、DBP、SBP1、eEF-1、ACTB、CKB、PSMC3、DDAH-1、NADH 脫氫酶硫-鐵蛋白1 等13 個蛋白質.