表皮生長因子受體調控的人鼻咽癌細胞系CNE2 分泌蛋白質的篩選

摘要為篩選表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR) 調控的鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，NPC) 細胞的分泌蛋白質，揭示EGFR 在NPC 發病中的作用機制，采用無血清培養法培養NPC 細胞系CNE2，并用轉化生長因子(transforming growth factor-α，TGF-α) 刺激CNE2 細胞24 h 作為實驗組，對照組CNE2 細胞不用TGF-α刺激. 超濾法脫鹽并濃縮兩組細胞的培養上清制備分泌蛋白，采用雙向凝膠電泳技術(two-dimensional electrophoresis，2-DE) 分離兩組細胞的分泌蛋白，PDquest 圖像分析軟件識別差異表達的蛋白質點，基質輔助激光解吸電離飛行時間質譜(matrix-assisted laserdesorption/ionization time of flight massspectrometry，MALDI-TOF-MS) 鑒定差異表達蛋白. 建立了實驗組和對照組CNE2 細胞分泌蛋白的2-DE 圖譜，圖像分析識別了22 個差異蛋白質點，質譜鑒定了8 個非冗余蛋白質，其功能涉及腫瘤細胞侵襲轉移、細胞凋亡和增殖，為進一步揭示EGFR 在NPC 發病中的作用及其機制奠定了基礎.