重組人胰島素樣生長因子21 分離純化工藝的建立

摘要:目的　建立重組人胰島素樣生長因子21 (rhIGF21) 大腸桿菌表達后的高效分離純化工藝,以便獲得高純度的重組蛋白。方法　已構建好的表達載體轉化大腸桿菌BL21 ,經IPTG誘導進行表達。將離心收集到的菌體用超聲破壁,破壁菌液離心分離,收集上清液,進行陰離子交換層析、疏水層析和分子篩純化,得到最終純品。蛋白純度用SDS2PAGE 鑒定, EL ISA 法檢測rhIGF21 含量,檢測純化后重組蛋白的生物學活性。結果　用大腸桿菌BL21 表達rhIGF21 以可溶性形式存在胞漿中,經3 步柱層析純化后,可獲得高純度的rhIGF21 (純度> 98 %) 。該蛋白在體外具有良好的促NIH3 T3 細胞增殖作用。結論　建立了rhIGF21 分離純化工藝,其工藝流程可獲得具有生物學活性的高純度rhIGF21 ,為產業化及臨床應用奠定基礎。