局灶性腦缺血大鼠海馬蛋白質組差異表達圖譜的構建及針刺影響

摘要: [目的] 構建局灶性腦缺血早期大鼠海馬蛋白質組差異表達圖譜, 尋找與腦缺血相關蛋白質, 探討腦缺血的病理機制及針刺影響。[方法] Wistar 大鼠隨機分為正常組、假手術6 h、模型6 h、醒腦開竅針刺6 h( 簡稱醒針6 h) 和傳統對照6 h 組( 簡稱對照6 h) , 采用改進的線栓法制備動物模型。在規定時間快速斷頭取腦, 剝離缺血側海馬, 提取腦組織總蛋白進行雙向電泳, 以Image Master 2D V3.01 Elite 軟件進行圖像分析。選取差異蛋白質點進行膠內酶解, 以(MALDI- TOF-MS) 測肽質量指紋圖, 檢索Swiss- Port 數據庫, 對蛋白質進行鑒定。[結果] 正常組與假手術組比較無差異蛋白表達; 模型組與正常組比較鑒定出差異蛋白質點29 個, 其中在模型6 h 組新出現1 個, 在模型6 h 表達上調的11 個, 表達下調的17 個; 醒腦開竅針刺組與模型組比較鑒定出差異蛋白質點21 個, 其中在醒腦開竅針刺組上調有16 個,下調的有5 個; 對照組與模型組比較鑒定出差異蛋白質點20 個, 下調的有8 個, 上調的有12 個。[結論] 以雙向電泳聯合質譜技術, 初步發現與腦缺血相關的部分蛋白質, 有助于深入研究腦缺血性損傷病理機制, 并發現針刺治療腦缺血的部分靶蛋白質, 及“醒腦開竅”針刺法與傳統對照針刺治療腦缺血性損傷作用機制的異同。