人脾臟樹突狀細胞的分離純化與鑒定

【摘要】　目的　建立人脾臟體外培養樹突狀細胞的新方法。方法　人脾臟細胞懸液培養2 h 后獲得貼壁的單核細胞,加入重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(rhGM CSF) 100μg/ L 或rhGM CSF 100μg/ L + 重組人白細胞介素4 (rhIL 4) 500 k/ L ,體外培養1 周,收集懸浮細胞,以流式細胞儀分析細胞表型及抗原內吞能力,allo MLR 檢測細胞抗原呈遞功能。結果　以細胞因子培養7 d 生成的懸浮細胞,20 %～80 %表達樹突狀細胞特異性標志CD1a ,表達高水平的MHC2 Ⅱ、B71、B72 分子,具有較強的抗原內吞能力,抗原內吞能力及T淋巴細胞活性與人外周血單核細胞培養獲得的DC 相似。結論　從人脾臟獲得的貼壁的單核細胞,體外以rhGM CSF + rhIL 4 培養,可以獲得極其大量的樹突狀細胞。