兩種兔源內毒素結合蛋白的分離、純化及其體外生物學活性的對比研究

【摘要】　目的　從燒傷合并內毒素血癥致多器官損害家兔血清中分離純化內毒素結合蛋白,并初步對比研究它們的生物學活性。方法　兔血清蛋白質通過二步離子交換層析(Bio2Rex 70 Resin、Mono2Q) 及凝膠過濾分離純化,并經流式細胞分析實驗、綿羊紅細胞凝聚實驗、氨基末端氨基酸殘基測序等方法鑒定,再將所獲蛋白質作用于體外培養的人單核細胞(U937) ,觀測其分泌TNFα等細胞因子的生物效應。結果　獲得兩種具有促進內毒素(L PS) 與外周血單核細胞( PBMC) 結合的蛋白質,其中一種相對分子質量為610 ×104 ,其N 端10 個氨基酸序列為TNPGL ITRIT ,證實為兔內毒素結合蛋白(LBP) ;另一種蛋白質相對分子質量為418 ×104 ,其N 端10 個氨基酸序列為GSQGTFTSEE ,與NCBI 蛋白質庫中的氨基酸序列進行比較,未發現相同序列,命名為p48 。結論　p48 與LBP 具有相似的生物學功能,p48 的生物學活性稍弱于LBP。提示體內除LBP 外,p48 也
同樣起著介導L PS 的毒性作用。這可能是近年國外研究中阻斷LBP 的活性后,機體毒性反應并無明顯減輕的原因之一。