杜仲橡膠顆粒結合蛋白的分離、純化及抗體制備

摘　要: 　采用重復漂洗P離心法分離純化了杜仲橡膠顆粒,SDS- PAGE 分析發現杜仲橡膠顆粒含有十幾種蛋白,其中以56 ku、30 ku 2 種蛋白的豐度較高, 分別稱之為EuRPP56和EuRPP30 。對杜仲雌雄株的比較表明,杜仲雌株葉片、雌株樹皮及果皮中橡膠顆粒蛋白均是EuRPP30 含量高于EuRPP56 ,而雄株葉片、雄株樹皮中正相反。進一步分離純化了杜仲橡膠顆粒中豐度較高的30 ku 蛋白,并制備了該蛋白的抗體。免疫細胞化學分析結果表明,在葉片的含膠細胞中有陽性反應,而其它細胞無陽性反應。以上工作為研究杜仲膠粒結合蛋白功能以及闡明杜仲膠生物合成機制奠定基礎。