鯽魚血清和皮膚粘液IgM 的分離純化及部分性質的鑒定

摘要: 采用鹽析法結合葡聚糖凝膠柱, 分離純化鯽魚血清IgM; 然后制備兔抗鯽魚血清IgM 多克隆抗體,將其偶聯到Sepharose 4B 上制成親和柱, 用于分離純化皮膚粘液IgM。結果表明: 33 %～45 %硫酸銨溶液沉淀處理可以去除鯽魚血清中除IgM 外的很多雜蛋白, 再經葡聚糖凝膠柱純化, IgM 純度可達80 %以上, 其重鏈和輕鏈的分子量分別為79 和25 kDa ; 以兔抗鯽魚血清IgM 多克隆抗體親和柱分離皮膚粘液IgM , 分離效果良好,IgM 重鏈的分子量為88 kDa ; Western blot 顯示兔抗鯽魚血清IgM 多克隆抗體識別的是血清和皮膚粘液IgM 的重鏈部分。用ELISA 測定鯽魚血清中IgM 含量在一年中的變化, 結果表明IgM 在春夏季的含量高于秋冬季。