羊耳菊提取物的抗炎活性及在大鼠體內的代謝產物分析研究

羊耳菊屬于我國的傳統中藥，研究發現羊耳菊提取物對金黃色葡萄球菌具有抑菌作用，是一種具有開發潛力的新抗菌藥物資源。而進行羊耳菊提取物給藥后在大鼠糞便中的代謝產物分析，對該藥材的合理用藥和新劑型的開發具有重要的意義。

一般來說中草藥具有抗微生物活性是由于提取物中存在著多種化學成分，中藥有效成分在動物及人體內的代謝產物分析對于闡明中藥的有效性，探討有效成分的作用原理，解釋中藥復方配伍的合理性等具有重要作用。而且中藥成分代謝產物分析的研究還為發現新的活性成分、新藥合成及新的前體藥物的研制提供可貴的理論和實踐依據。美迪西提供藥物代謝產物分析服務，其藥代動力學實驗室已經通過CFDA的GLP認證，實驗研究遵循ICH、CFDA和FDA的指導原則，可以根據客戶需求設計并開展體內、體外藥代動力學試驗，為客戶提供一整套藥代動力學評價和優化服務。

因為中藥及其制劑的給藥方式多數以口服為主，在胃腸道被吸收后分布到靶器官從而發揮療效，再經代謝作用最后排出體外。胃腸道不僅是藥物吸收的主要部位，同時對藥物也有一定的代謝作用，部分難以吸收的藥物可能在腸道菌群的作用下轉變為易吸收的成分，因此腸道菌群對藥物療效的發揮起到了重要的作用。并且中藥及其制劑成分復雜，在體內的代謝過程和作用機制尚不明確，直接口服給藥后，研究其體內過程和直接藥效物質比較困難，因此進行羊耳菊提取物的在動物體內的代謝產物分析，研究羊耳菊中主要藥效物質的體外代謝規律，能夠為藥材的體內過程研究奠定一定基礎。

1、羊耳菊提取物的抗菌和抗炎活性研究

我國有研究者采用不同溶劑對羊耳菊藥材進行提取，并對提取物進行抗菌和抗炎活性評價。論文作者首先分別采用水以及不同濃度的乙醇對羊耳菊藥材進行提取，然后分別采用牛津杯法、試管二倍稀釋法以及LPS刺激RAW 264.7細胞模型評價不同提取溶劑的羊耳菊提取物的抗菌和抗炎活性。

結果顯示，生藥濃度為1.0g?ml~(-1)的水提物、30%乙醇提取物、60%乙醇提取物、80%乙醇提取物對金黃色葡萄球菌均有抑制作用，各提取物對金黃色葡萄球菌的MIC值分別為:250mg?ml~(-1)、125mg?ml~(-1)、62.5mg?ml~(-1)、250 mg?ml~(-1)，其中60%乙醇提取物抑菌效果最佳。不同提取物在0~250μg?ml~(-1)范圍內作用RAW 264.7細胞24 h對細胞無毒性影響。不同提取物在50~250μg?ml~(-1)的范圍內能夠有效抑制LPS刺激RAW 264.7細胞釋放NO，其中60%乙醇提取物的抗菌和抗炎活性較好。因此 60%乙醇作為提取溶劑所制備的羊耳菊提取物的抗菌和抗炎活性較好。

2、羊耳菊提取物在大鼠體內的代謝產物分析

羊耳菊提取物給藥后在大鼠糞便中的代謝產物，為該藥材的后續研究與開發提供參考。研究者采用超高效液相色譜-三重四級桿飛行時間質譜(UPLC-Q-TOF-MS/MS)檢測大鼠口服羊耳菊提取物后糞便中的代謝產物，每次給藥劑量100 g?kg~(-1)。使用RRHD Eclipse Plus C_(18)色譜柱(2.1 mm×100 mm，1.8μm)，流動相0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液梯度洗脫，選擇電噴霧離子源，負離子模式進行掃描，準確質量測定采用甲酸鈉校正標準液，采用Metabolite Detect(micr OTOF 2.3)等軟件進行數據處理，鑒定代謝產物的化學結構。

結果在大鼠糞便中檢測到原型M8(1，3-O-二咖啡酰基奎寧酸)、M1~M4(二氫單咖啡酰基奎寧酸異構化產物)、M5(二氫咖啡酸的硫酸酯化產物)、M6~M7(單咖啡酰基奎寧酸的甲基化產物)等22個代謝產物。因此羊耳菊提取物給藥后，咖啡酰基奎寧酸類活性成分在大鼠糞便中的代謝途徑以甲基化、還原反應為主。

羊耳菊用于治療感染性疾病在我國一些地方既具有傳統的經驗，又具有微生物學基礎，是一種有希望開發的天然抗菌劑。羊耳菊提取物給藥在大鼠體內的代謝產物分析，有助于理解羊耳菊抗微生物作用的機制，可為該藥材的后續研究與開發提供參考。